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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
螺旋體亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR4171
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR4171
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

螺旋體亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Treponema pallidum subsp. Pallidum

LZR4171

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

蔗糖伯克霍爾德氏菌Sheep PC (Plasma Anticoagulant Protein C) ELISA Kit拉丁屬名: Burkholderia sacchari

醋化醋桿菌Sheep GPC3 (Glypican 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Acetobacter aceti

芽孢桿菌Sheep GSANA (Granulocyte Specific Anti-Nuclear Antibody) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

雜色曲霉Sheep ACA-IgG (Anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus versicolor

嗜鹽長(zhǎng)單胞菌 Sheep LAP (Leucine Aminopeptidase) ELISA Kit拉丁屬名: Longimonas halophila

多主枝孢Sheep CK-18/KRT18 (Cytokeratin 18) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium herbarum (Persoon) Link et Fries

淡紫灰鏈霉菌Sheep TGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。

枯草芽孢桿菌Sheep PYY (Peptide YY) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

黃褐環(huán)銹傘Sheep TSLP (Thymic Stromal Lymphopoietin) ELISA Kit 拉丁屬名: Pholiota spumosa

大腸埃希氏菌Sheep SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

釀酒酵母Sheep PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

鹽田鹽單胞菌Sheep APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas campisalis

大豆慢生根瘤菌Sheep GTF2B (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮

黃曲霉Sheep τPK1 (Tau-Protein Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  flavus

大腸埃希菌Sheep ANG (Angiogenin) ELISA Kit拉丁屬名: coli
螺旋體亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/蘇氨酸激酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

骨形態(tài)發(fā)生蛋白4 Anti-BMP4 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-E2F1 (Ser364) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1 規(guī)格 0.1ml

X射線攝影暗匣5*7+增感屏 套

ZNF81 英文名稱: 鋅指蛋白81 0.2ml

phospho-DAP Kinase 2 (Ser318) 英文名稱: 磷酸化凋亡相關(guān)蛋白激酶2 0.1ml

骨形態(tài)發(fā)生蛋白4 Anti-BMP4 0.1ml

CCKBR 英文名稱: 促胃泌素受體 0.1ml

Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

PARC/CCL18(Human pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉頭蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α 96T

SPOCK2 英文名稱: 蛋白聚糖2 0.2ml

Rhesus antibody Rh NPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前體蛋白 規(guī)格 0.2ml

Col I (Human Collagen Type I ) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原 96T

TPX2 英文名稱: 微管相關(guān)同源蛋白TPX2 0.2ml

C6orf225 英文名稱: 6號(hào)染色體開放閱讀框225 0.2ml

Anti-phospho C-Met/HGFR(Tyr1365) 磷酸化原癌基因c-MetMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine E-Selectin ELISA Kit進(jìn)口/原裝

α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine Interferon α,IFN-α ELISA Kit特價(jià)促銷

Coronin 1a 英文名稱: 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CORO1A 0.1ml

Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser890) 磷酸化谷氨酸受體1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗人絨毛膜激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) 磷酸化KB抑制蛋白激酶βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAGEA10 相關(guān)抗原10 規(guī)格 0.2ml

DPD(Human deoxypyridinoline) ELISA Kit 人脫氧酚/脫氧啉 96T

phospho-RAD9(Ser272) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì) 0.1ml

 


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