- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4172
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4172 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Treponema pallidum | LZR4172 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
赭色栓菌Sheep MTHFR (Methylenetetrahydrofolate Reductase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽胞桿菌枯草亞種Sheep CEA (Carcinoembryonic Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
田無鏈霉菌Sheep FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces tanashiensis
谷氨酸棒桿菌Sheep PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
頭狀禿馬勃Sheep P-CK (Pan-Cytokeratin) ELISA Kit用途: 幼時可食,成熟藥用
綠黃鏈霉菌Sheep ALK (Anapastic Lymphoma Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces viridoflavus
Aeromonas aquariorumSheep CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aeromonas aquariorum
林生毛霉Sheep ANGPTL1 (Angiopoietin Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor hiemalMucor silvaticus
美澳型核果褐腐病菌Sheep PHLDA2 (Pleckstrin Homology Like Domain Family A, Member 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種Sheep EMP (Erythrocyte Membrane Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Clavibacter michiganensis subsp. tessellarius
甜菜慢生根瘤菌Sheep INSR (Insulin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bradyrhizobium betae
熱葡糖苷酶土芽孢桿菌Sheep IL-4 (Interleukin 4) ELISA Kit拉丁屬名: Geobacillus thermoglucosidasius
欽海特德沃斯氏菌Sheep PAIg (Platelet Associated Immunoglobulins) ELISA Kit拉丁屬名: Devosia chinhatensis
枯草芽孢桿菌Sheep CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽胞桿菌枯草亞種Sheep α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit
拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Anti-Zyxin/FITC 熒光素標(biāo)記斑聯(lián)蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2 規(guī)格 0.1ml
DCX(Doublecortin) 雙皮質(zhì)素抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit特價(jià)促銷
人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human fibronection related antigen,FRA ELISA Kit特價(jià)促銷
人纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Fibroblast surface protein,FSP ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人?;碳さ鞍?/span>(ASP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit特價(jià)促銷
CCL13 英文名稱: 單核細(xì)胞趨化蛋白4 0.2ml
Anti-PLASTIN3/T Plastin 絲束蛋白T PlastinMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA KIT 人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Parkin protein 帕金蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HOXA5 同源異型盒基因HOXA5蛋白 規(guī)格 0.1ml
IL-1 ELISA Kit 大鼠白介素1 96T
Polycystin 2 英文名稱: 蛋白2 0.2ml
VWF 英文名稱: 假性因子/性因子 0.1ml
Delta Opioid Receptor 英文名稱: D型受體 0.1ml
anti-AQP1 水通道蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
EID1 英文名稱: 乙?;D(zhuǎn)移酶EID1 0.2ml
CD7 Anti-CD7 0.1ml
Anti-VEGF-D/FIGF/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠內(nèi)皮生長因子D型VEGFDIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GPS1/CSN1(Ser474) 磷酸化G蛋白通路抑制蛋白1 規(guī)格 0.1ml
Cortactin 英文名稱: 皮層肌動蛋白 0.2ml
Anti-GRIM19 干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Beta2-GP1 Ab IgA(Human Beta2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit 人β2糖蛋白1IgAMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Integrin Alpha V + Beta1 整合素αVβ1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Lingo-1 Nogo受體反應(yīng)蛋白 規(guī)格 0.1ml
HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 人狀瘤病毒IgM 96T
RND2/Rho7 英文名稱: Rho家族GTP酶2 0.2ml