- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4190
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4190 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬毛癬菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Trichophyton equinum | LZR4190 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
醋桿菌屬 3-NT (3-Nitrotyrosine) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter sp.
病研所芽孢桿菌8-epi-PGF2α (8-Epi-Prostaglandin F2 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus idriensis
MarisediminicolaADMA (Asymmetrical Dimethylarginine) ELISA Kit拉丁屬名: Marisediminicola antarctica
死亡谷芽孢桿菌EPI (Epinephrine/Adrenaline) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus vallismortis
產(chǎn)朊假絲酵母DA (Dopamine) ELISA Kit拉丁屬名: Candida utilis
釀酒酵母(有現(xiàn)成的)NA/NE (Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
總狀共頭霉VB2 (Vitamin B2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
褐環(huán)乳牛肝菌FMN (Flavin mononucleotide) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
頂頭孢霉FAD (Flavin adenine dinucleotide) ELISA Kit拉丁屬名: Cephalosporium acremonium Corda
大豆慢生根瘤菌AA (Arachidonic Acid) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮
油菜菌核病菌PGE1 (Prostaglandin E1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
哈茨木霉LXA4 (Lipoxin A4) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma harzianum
Actinophytocola6-keto-PGF1a (6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit拉丁屬名: Actinophytocola sp.
乳酸乳球菌乳亞種2,3-dinor-TXB2 (2,3-dinor Thromboxane B2) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp. lactis
膠紅酵母cAMP (Cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula mucilaginosa
馬毛癬菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Rad51 Anti-Rad51 0.2ml
Anti-Syntaxin 1/Syn1A /FITC 熒光素標(biāo)記突觸融合蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MK5(Ser311+Thr315) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶5 規(guī)格 0.1ml
ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒英文名稱:human Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit特價供應(yīng)
人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒英文名稱:Human parathyroid hormone-like protein,PLP ELISA Kit特價促銷
CCR-1 英文名稱: 細(xì)胞表面趨化因子受體1 0.1ml
Anti-IL-13Ra1 白細(xì)胞介素-13受體a1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AFP(Human Alpha-fetoprotein) ELISA Kit 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化異染色質(zhì)蛋白1(果蠅)Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Rhesus antibody Rh MCM3 染色體維持缺陷蛋白3 規(guī)格 0.2ml
IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit 人白介素受體相關(guān)激酶 96T
RALA 英文名稱: Ras樣蛋白A 0.2ml
BAP31 英文名稱: BAP31蛋白 0.1ml
Anti-SSTR3 生長抑素受體3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
RBP ELISA Kit 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TBX18 轉(zhuǎn)錄因子Tbx18Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Bovine IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗IgG 規(guī)格 0.1ml
U-TSH ELISA Kit 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素 96T
Nanog 英文名稱: 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白 0.1ml
CPB2 英文名稱: 胰羧肽酶B2 0.2ml
Anti-MT-ND1 NADH復(fù)合體1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AA(Human Arachidonic Acid) ELISA Kit 人花生四烯酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Megsin 絲氨酸蛋白酶抑制劑B7Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Jab1 Jun激活區(qū)域-連接蛋白1 規(guī)格 0.1ml
Human echinococcus antibody IgG ELISA Kit 人包蟲IgG 96T
PGBD3 英文名稱: PGBD3蛋白 0.2ml