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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4196
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4196 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
皺紋毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Trichostrongylus rugatus | LZR4196 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
緊密毛霉Tn-I (Troponin I) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor strictus
固氮螺菌屬PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Azospirillum humicireducens
谷氨酸棒狀桿菌ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum (Kinoshita et al.) Abe et al
鞘氨盒菌屬GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingopyxis wooponensis
堅硬芽孢桿菌IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus firmus
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
葡萄座腔菌IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Botryosphaeria dothidea
枯草芽孢桿菌FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
粉紅單端孢霉IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
檸檬黃色農(nóng)球菌TF (Serotransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Agrococcus citreus
油菜菌核病菌CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
溶桿菌GH (Growth Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Lysobacter sp.
Erwinia amylovoraIL-9 (Interleukin 9) ELISA Kit拉丁屬名: Erwinia amylovora
運動節(jié)桿菌PCIII (Procollagen III) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter agilis
金龜子綠僵菌PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Metarhizium anisopliae
皺紋毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商TMIGD1 英文名稱： 跨膜TMIGD1蛋白 0.1ml
Anti-beta-Amyloid(25-35) β淀粉樣肽(25-35)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ET-1 英文名稱： 內(nèi)皮素1 0.1ml
非受體型酪氨酸蛋白激酶 Anti-SYK 0.1ml
Anti-TIMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶組織抑制因子-1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-LSP1 (Ser204) 磷酸化白細(xì)胞F肌動蛋白結(jié)合蛋白 規(guī)格 0.1ml
phospho-BAD(pSer128) 磷酸化相關(guān)死亡促進因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CCR4 英文名稱： 細(xì)胞表面趨化因子受體4 0.1ml
Anti-IL-15RA 白介素15受體αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit 人細(xì)胞癌抗原2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HO-2 血紅素氧合酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MCP-2/CCL8 單核細(xì)胞趨化蛋白2 規(guī)格 0.2ml
PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體 96T
RBMX2 英文名稱： RNA結(jié)合蛋白X-連鎖蛋白2 0.1ml
AD7C-NTP 英文名稱： 神經(jīng)絲蛋白 0.2ml
Anti- Beta-arrestin 2/FITC 熒光素標(biāo)記β-抑制蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TG ELISA Kit 大鼠甲狀腺球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti- Beta-Amyloid(1-40)/FITC 熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽(1-40)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FOXO3A 叉頭蛋白O3A 規(guī)格 0.2ml
AmAC-1 ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1 96T
NCR2 英文名稱： 細(xì)胞毒性受體NK-p44 0.2ml
CPLX1 英文名稱： Complexin I/復(fù)合素1 0.2ml
Anti-phospho-IRS1(Ser612) 磷酸化受體底物-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit 人組織蛋白酶DMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Nox-4/NADH NADPH氧化酶4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IHH HHG2 規(guī)格 0.2ml
CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素 96T
phospho-AMPK alpha 2 (Ser173) 英文名稱： 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2 0.1ml
