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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
微細(xì)毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4198
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4198
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

微細(xì)毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Trichostrongylus tenuis

LZR4198

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

小單孢菌ApoC1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。

枯草芽孢桿菌ApoC2 (Apolipoprotein C2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

洪吉氏菌ApoC3 (Apolipoprotein C3) ELISA Kit拉丁屬名: Hongiella  sp.

硬毛栓孔菌ApoC4 (Apolipoprotein C4) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes trogii

毛頭鬼傘ApoD (Apolipoprotein D) ELISA Kit 拉丁屬名: Coprinus comatus

黑球漆斑菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 用途: 分解纖維素

釀酒酵母ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

氧化節(jié)桿菌ApoH (Apolipoprotein H) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter oxydans

草菇ApoM (Apolipoprotein M) ELISA Kit 拉丁屬名: Volvariella volvacea(Bull.:Fr.) Sing.

金黃色葡萄球菌ApoA5 (Apolipoprotein A5) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus

球孢白僵菌ApoB100 (Apolipoprotein B100) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

平菇(側(cè)5)ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大腸埃希氏菌Aβ40 (Amyloid Beta 40) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

變異納西桿菌Aβ42 (Amyloid Beta 42) ELISA Kit拉丁屬名: Naxibacter varians
微細(xì)毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格C* anaphylatoxin 英文名稱: 過敏毒素C*/補體C* 0.1ml

Anti-CCR-3 細(xì)胞表面趨化因子受體3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Cholecystokinin,CCK ELISA Kit特價促銷

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse protein kinase B,PKB ELISA Kit特價供應(yīng)

小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA Kit進口/分裝

小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒英文名稱:Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit特價供應(yīng)

小鼠免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse LDL-IC ELISA Kit進口/原裝

CCR7 英文名稱: 細(xì)胞表面趨化因子受體7 0.1ml

Anti-Cathepsin D 組織蛋白酶DMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

MIP-1 Gamma 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1γMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Crk p38 /CrkII Crk p38Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Nm23/NME1/NME2 轉(zhuǎn)移抑制基因 規(guī)格 0.1ml

Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit 人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運蛋白/T細(xì)胞活化蛋白 96T

phospho-Tau protein(Ser422) 英文名稱: 磷酸化微管相關(guān)蛋白 0.1ml

3-Apr 英文名稱: 細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白3 0.1ml

Anti-CCR-2/5/FITC 熒光素標(biāo)記CC趨化因子受體2/5IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

TE ELISA Kit 大鼠端粒酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Ack1/FITC 熒光素標(biāo)記Ack1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FGFR2/CD332 成纖維細(xì)胞生長因子受體2 規(guī)格 0.1ml

HNT-4(uman Neurotrophin 4) ELISA KIT 人神經(jīng)營養(yǎng)因子4 96T

MIP4 英文名稱: 巨噬細(xì)胞蛋白18 0.1ml

CPN10 英文名稱: 葉綠體伴侶蛋白(蘋果) 1ml

Anti-PARP (N-Terminus) 多腺苷二磷酸多聚酶(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

TR(Human targeted ribonuclease) ELISA Kit 人靶向核糖核酸酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Nm23-H1 抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IL-10RB/CRFB4 白細(xì)胞介素-10受體β 規(guī)格 0.1ml

sE-selectin ELISA Kit 大鼠可溶性E選擇素 96T

PAG1 英文名稱: 跨膜接頭蛋白PAG 0.1ml

 


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