- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4210
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4210 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Trypanosoma congolense | LZR4210 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
假單胞菌屬APO-A1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas sp.
豌豆根瘤菌ApoB (Apolipoprotein B) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizobium leguminosarum
毛頭鬼傘,雞腿菇APO-C1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母APO-C4 (Apolipoprotein C4) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
緊密假諾卡氏菌APO-E (Apolipoprotein E) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudonocardia compacta
梭菌APO-F (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁屬名: septicum
托姆青霉APO-H (Apolipoprotein H) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium thomii
泛酸枝芽胞桿菌ApoB100 (Apolipoprotein B100) ELISA Kit拉丁屬名: Virgibacillus pantothenticus
腫塊芽孢桿菌屬GROγ (Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Tuberibacillus sp. nov.
栗疫菌AGER (Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
金針菇ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Collybia velutipes (Curt.: Fr.) Quél.
嗜中溫寒冷桿菌bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Frigoribacterium mesophilum
釀酒酵母Bcl-2 (B-Cell Leukemia/Lymphoma 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
銀白離褶傘β-EP (Beta-Endorphin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
果生鏈核盤菌BMP-1 (Bone Morphogenetic Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格細(xì)胞間粘附分子-3 Anti-CD50/ICAM-3 0.1ml
Anti-p-VEGFR2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化內(nèi)皮生長因子受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GIT1(Tyr510) 磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1 規(guī)格 0.1ml
Cdkn1c/p57/Kip2 (Cyclindependent kinase inhibitor 1C) 周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人肌抑素(MSTN)ELISA試劑盒英文名稱:Human Myostatin,MSTN ELISA Kit/原裝
人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒英文名稱:Human lumican,LUM ELISA Kit特價(jià)促銷
人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit特價(jià)促銷
CD137 英文名稱: 壞死因子受體超家族成員9 0.1ml
Anti-IFN-Beta 干擾素-β(抗人)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
ATMA/TMAB(Human Anti-Thyroid Microsome Antibody) ELISA KIT 人抗甲狀腺微粒體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IL-6R Alpha 白細(xì)胞介素6受體αMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LPLUNC1 癌基因 規(guī)格 0.1ml
GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖磷脂酰肌醇 96T
RAP1A 英文名稱: 抗Rap1A 0.1ml
DIRAS2 英文名稱: DIRAS2蛋白 0.2ml
Anti-Anthrax 炭疽桿菌Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EAAT4 英文名稱: 膠質(zhì)細(xì)胞谷酸運(yùn)載蛋白4 0.2ml
臂板蛋白4C Anti-Sema4C 0.2ml
Anti-TBX2/T-box2/FITC 熒光素標(biāo)記新型基因IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MEF2A(Thr319) 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2 規(guī)格 0.1ml
AQP9(aquaporin Protein-9) 水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CRCT1 英文名稱: 富含半胱酸C端蛋白1 0.2ml
Anti-GM-CSF 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞克隆刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
NT-3 ELISA Kit 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GM-CSFR alpha/CD116 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體αMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse anti-Bovine IgG ascites 小鼠抗IgG腹水 規(guī)格 1ml
sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit 人可溶性肌球蛋白重鏈1 96T
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2) 英文名稱: 磷酸化RNA聚合酶II CTD 0.1ml