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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4247
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4247 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
高首鱘虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | White Sturgeon Iridovirus(WSIV) | LZR4247 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
普利茅斯沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia plymuthica
志賀氏菌拉丁屬名: Shigella dysenteriae
赭鱗蘑菇用途: 食用菌、藥用
俄勒岡靈芝拉丁屬名: Ganoderma oregonense
苜蓿中華根瘤菌拉丁屬名: Ensifer meliloti
扣囊復(fù)膜孢酵母拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
小馬勃注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
灰黃淺黃酵母拉丁屬名: Chrysozyma griseoflava
貝氏葡萄座腔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
擬鷲峰假絲酵母拉丁屬名: Candida pseudojiufengensiss
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
紅色蠟?zāi)⒆⒁馐马?xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
粘質(zhì)沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia marcescens
食砜節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter sulfonivorans
球孢枝孢拉丁屬名: Cladosporium sphaerospermum
高首鱘虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr412) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl 規(guī)格 0.1ml
HRP穩(wěn)定劑 10ml/100ml pH7.2，無(wú)蛋白成分
VPREB1 英文名稱： B淋巴細(xì)胞前體蛋白1 0.2ml
phospho-Dnmt1(Ser732) 英文名稱： 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1 0.1ml
Anti-AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ETNK2 英文名稱： 乙醇胺激酶2 0.2ml
神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1 Anti-CD171/NCAM-L1 0.1ml
CD28 英文名稱： CD28 0.1ml
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CCSA-3(Human colon cancer-specific antigen-3) ELISA kit 人專一抗原3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HCFHrp/BTA 膀胱抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MIP-1 Beta/CCL4 巨噬細(xì)胞因子1β MIP-1β 規(guī)格 0.1ml
ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人間變性激酶 96T
RING finger protein 189 英文名稱： 環(huán)指蛋白189 0.2ml
Anti-Casein 酪蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
魚孕激素/孕酮（PROG）ELISA試劑盒 英文名稱：PROG ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
規(guī)格:5*96孔圓環(huán)病毒IgGELISA試劑盒英文名稱：Elisa特價(jià)供應(yīng)
植物25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 英文名稱：Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
植物赤霉素（GA） ELISA試劑盒英文名稱：Plant Gibberellic Acid,GA ELISA Kit特價(jià)促銷
植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒 英文名稱：Plant calmodulin,CAM ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CRYZL1 英文名稱： 醌氧化還原酶樣蛋白1 0.2ml
Anti-GRP78 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(熱休克蛋白70蛋白5)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
IP-10/CXCL10(Human interferon-inducible protein 10) ELISA Kit 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CXCL13/BCA1 B-淋巴細(xì)胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人紐蛋白 96T
Phospho-Raptor (Ser792) 英文名稱： 磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白 0.1ml
