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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4249
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4249 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
沃爾巴克氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Wolbachia spp. | LZR4249 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Mesorhizobium拉丁屬名: Mesorhizobium sediminum sp. nov.
中間檸檬酸桿菌拉丁屬名: Citrobacter intermedias
密叢毛霉拉丁屬名: Mucor plumbeus
巴氏葡萄球菌拉丁屬名: Staphylococcus pasteuri
米根霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae
芋枝孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
耐久腸球菌拉丁屬名: Enterococcus durans
靈芝注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Bacillus atrophaeus注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
細(xì)極鏈格孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Chrysonilia sitophila注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
海海芽孢桿菌拉丁屬名: Marinibacillus marinus
竹喙球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
沃爾巴克氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 人絨毛膜激素(HCG)ELISA試劑盒英文名稱：Human Chorionic Gonadotrophin，HCG ELISA Kit進(jìn)口/分裝
phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 磷酸化原活化蛋白激酶p38抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-MASH1 神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2 規(guī)格 0.1ml
Tgase 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UEVLD 英文名稱： 泛素結(jié)合酶E2樣蛋白 0.2ml
DIRC2 英文名稱： 干擾蛋白2 0.2ml
CD2BP3 英文名稱： CD2結(jié)合蛋白3 0.2ml
Anti-lamin A 核纖層蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NF-M 中分子量神經(jīng)絲蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-17RB 白介素-17B受體 規(guī)格 0.1ml
IL-5 ELISA Kit 大鼠白介素5 96T
Profilin 1 英文名稱： 前纖維蛋白1 0.1ml
HA Kit Influenza 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對 ELISA
TRPM3 英文名稱： 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白3(M亞家族) 0.2ml
CYP11B2 英文名稱： 醛固酮合成酶CYP11B2 0.2ml
Anti-cdc25A 細(xì)胞分裂周期蛋白25Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse oxytocin,OT ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒英文名稱：mouse prolactin,PRL ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Big Endothelin,Big ET ELISA Kit進(jìn)口/分裝
CSF3 英文名稱： 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3 0.1ml
anti-Cathepsin L 組織蛋白酶LMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Phospho-Beta-Catenin (Ser675) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCDHGA9 原鈣粘蛋白γA9 規(guī)格 0.2ml
RBP4 Kit Human 人 RBP4 / PRBP ELISA配對 ELISA
phospho-Tau protein(Ser519) 英文名稱： 磷酸化微管相關(guān)蛋白 0.1ml
