|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4262
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4262 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
螺源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | LZR4262 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
蹄形干酪菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
產(chǎn)水鏈霉菌拉丁屬名: Xanthobacter tagetidis
棉子糖腸球菌拉丁屬名: Enterococcus raffinosus
雅致小克銀漢霉拉丁屬名: Cunninghamella elegans
雅致放射毛霉拉丁屬名: Actinomucor elegans
科羅拉多擬無枝酸菌拉丁屬名: Amycolatopsis coloradensis
杰丁塞伯林德納氏酵母拉丁屬名: Cyberlindnera jadini
美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Monilinia fructicola
婁地青霉拉丁屬名: Penicillium roqueforti
少孢節(jié)叢孢拉丁屬名: Arthrobotrys oligospora
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
果生鏈核盤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
微球菌拉丁屬名: Micrococcus sp.
美極梅奇酵母拉丁屬名: Metschnikowia pulcherrima
剛第弓形蟲拉丁屬名: gondii
螺源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格人Salusin-α ELISA試劑盒英文名稱：Human Salusin α ELISA Kit進口/原裝
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒英文名稱：Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit進口/原裝
IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-ACEI 緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN2A/P16 (Ser152) 磷酸化基因p16 規(guī)格 0.1ml
人血清IgA液體(70-80%) 10mg 國產(chǎn)
WAVE 1 英文名稱： 富含脯酸同源蛋白1 0.2ml
CD36 英文名稱： CD36 0.1ml
Anti-HRH3/GPCR97 組織胺H3受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PA-IgG/M/A(Human platelet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit 人抗血小板IgG/M/AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-8/CXCL8 (mouse, rat) 白介素8 (小鼠，大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Lpin1 protein Lpin1 規(guī)格 0.2ml
Hyl(Human hydroxylysine) ELISA Kit 人羥賴酸 96T
RNF126 英文名稱： 環(huán)指蛋白126 0.2ml
phospho-DAXX (Ser668) 英文名稱： 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白 0.1ml
ADAM15 ADAM15 鼠單抗 (PE) Human
ELF1 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子ELF1 0.2ml
生精細胞凋亡相關(guān)基因3 Anti-TSARG3 0.2ml
Anti-TREML1/TLT1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser1101) 磷酸化受體底物-1 規(guī)格 0.1ml
Secretin receptor 分泌素受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CST8 英文名稱： 胱抑素8/半胱酸蛋白酶抑制劑8 0.2ml
Anti-FAK2/Pyk2 富含脯氨酸的酪氨酸激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Cytochrome-C 大鼠細胞色素CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-beta endorphin β-內(nèi)啡肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Musashi 1/Msi1 神經(jīng)干細胞RNA結(jié)合蛋白Musashi1 規(guī)格 0.2ml
PAIg(Human platelet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相關(guān)免疫球蛋白 96T
SEC14 like protein 2 英文名稱： SEC14樣蛋白2 0.2ml
