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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

擬青霉拉丁屬名: Paecilomyces sp.

香菇用途: 食用

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

燼灰鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces cinereogriseus (krainsky ss Krassilnikov) Yan et al.

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

淺玫瑰鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces roseolus

干草鞘氨單胞菌拉丁屬名: Sphingomonas faeni

金黑小單孢菌拉丁屬名: Micromonospora auratinigra

注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

米曲霉拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

*紅城紅球菌用途: 石油降解菌

產(chǎn)二素鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces ambofaciens

鏈格孢 蘋果?；妥⒁馐马?/span>: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

玉米大斑病菌拉丁屬名: Setosphaeria tuicicum

尖孢鐮孢拉丁屬名: Fusarium oxysporum
豹源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Angiopoietin 2 生成素2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin(Ser45) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白 規(guī)格 0.1ml

單組分TMB底物液 12ml/100ml 進口分裝

VSIG4 英文名稱： T淋巴細胞負調(diào)節(jié)蛋白 0.1ml

DLGAP2 英文名稱： PSD95結合蛋白2 0.2ml

Anti-Angiopoietin 2 生成素2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

CD4 英文名稱： CD4 0.1ml

Anti-Insulin (pig) (豬)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Bcl-2(Human B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA Kit 人B細胞因子2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Gst P1/GST class-pi 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MeCP2 甲基化CpG結合蛋白2 規(guī)格 0.1ml

pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 人磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 96T

RIPK-1 英文名稱： 絲酸蘇酸激酶1受體相互作用蛋白 0.1ml

尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運子1 Anti-OAT4L/URAT1 0.1ml

Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 熒光素標記磷酸化細胞信號轉(zhuǎn)導分子SMAD2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NPM (Thr95) 磷酸化核仁磷酸蛋白 規(guī)格 0.1ml

AEG-1 peptide AEG-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

人克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒 英文名稱：Human Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 特價促銷

人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒英文名稱：Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit進口/分裝

人空泡毒素相關蛋白A(VacA)ELISA試劑盒英文名稱：Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit特價促銷

CT74 英文名稱： /抗原74 0.2ml

Anti-phospho-p38(Thr180/Tyr182) 磷酸化-原活化蛋白激酶p38Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Ku-80 DNA修復酶Ku-80Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Laminin 1+2 層粘連蛋白1+2 規(guī)格 0.1ml

GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激素受體α 96T

PTBP1 英文名稱： 核糖核酸結合蛋白1 0.2ml