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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4278
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4278 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
狗源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4278 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
蟲草拉丁屬名: Cordyceps sp.
惡臭假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas putida
粘質(zhì)沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia marcescens
頂頭孢霉拉丁屬名: Cephalosporium acremonium
白絨紅蛋巢菌拉丁屬名: Nidula niveotomentosa
焦曲霉拉丁屬名: Aspergillus ustus (Bainier) Thom et Church
總狀共頭霉拉丁屬名: Syncephalastrum racemosum
耐輻射奇球菌拉丁屬名: Deinococcus radiodurans
散囊菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
煙曲霉拉丁屬名: Aspergillus fumigatus
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
光滑青霉拉丁屬名: Penicillium glabrum
茯苓注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas maltophilia (ex Hugh and Ryschenkow 1961) Hugh 1981
魯氏毛霉拉丁屬名: Mucor rouxianus (Calmette) Wehmer
狗源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格C8orf86 英文名稱： 8號(hào)染色體開放閱讀框86 0.2ml
Anti-phospho-c-Jun (Ser243) 磷酸化原癌基因c-JunMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Melamine/OVA(ovalbumin) 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg
Anti-CDK7 周期素依賴性激酶7Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh OGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase 8-羥基鳥嘌呤DNA糖基化酶 規(guī)格 0.1ml
Protein G Sepharose 4 Fast Flow 重組蛋白G親和層析柱 2ml柱床體積
TIMP-1(CT) 英文名稱： 金屬蛋白酶組織抑制因子-1(C端) 0.1ml
CD44v4 英文名稱： CD44V4 0.1ml
Anti-E-cadherin 上皮鈣粘附分子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MTHFR 亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFRMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Insulin 蛋白 規(guī)格 0.1ml
TIMP-3 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 96T
Phospho-PAK2 (Ser20) 英文名稱： 磷酸化p21激活激酶2 0.1ml
ARFIP1 英文名稱： ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1 0.1ml
Anti-CD3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NAP-2/CXCL7 ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ApoB/FITC 熒光素標(biāo)記載脂蛋白BIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM59A FAM59A蛋白 規(guī)格 0.2ml
FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 小鼠凋亡相關(guān)因子 96T
MYL1+3 英文名稱： 肌球蛋白輕鏈1/3 0.2ml
CTCF 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF 0.2ml
Anti-Phospho-FADD (Ser191) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 人狀瘤病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MAGE-1 相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KDEL (ER Marker) 賴氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，亮氨酸相關(guān)序列 規(guī)格 0.2ml
Big ET ELISA Kit 大鼠大內(nèi)皮素 96T
PDZD6 英文名稱： PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白 0.2ml
