- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4289
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4289 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
花生源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | 50T | LZR4289 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
德?tīng)柌加墟邎A酵母拉丁屬名: Torulaspora delbrueckii
檸檬色節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter citreus
絮邊蘑菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter agilis
稀褶乳菇拉丁屬名: Lactarius hygrophoroides
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
布魯氏菌病全乳環(huán)狀反應(yīng)抗原規(guī)格: 5ml
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
澳大利亞平臍蠕孢拉丁屬名: Bipolaris australiensis
燕麥?zhǔn)人峋鞴蟻喎N*注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
谷氨酸棒桿菌Ⅰ型拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
飼料類(lèi)芽胞桿菌用途: 分解纖維素,用于秸稈降解、腐熟
松木青霉拉丁屬名: Penicillium pinetorum
南海芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus nanhaiensis
花生源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 Matrixyl Acetate 五勝肽/美容肽—M肽Multi-class antibodies規(guī)格: 1g
大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 特價(jià)促銷(xiāo)
大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit進(jìn)口/原裝
GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 生長(zhǎng)分化因子8抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CD5 英文名稱(chēng): CD5 0.1ml
Anti-phospho-ERK1(Thr202/Tyr204) 磷酸化原活化蛋白激酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
FDA(Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase) ELISA Kit 人果糖1,6二磷酸醛縮酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Notch3 跨膜受體蛋白Notch-3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IKAROS 鋅指蛋白IKAROS 規(guī)格 0.2ml
HIS ELISA Kit 大鼠組胺 96T
SHP1 英文名稱(chēng): 蛋白酪酸磷酸酶1C 0.1ml
phospho-c-Jun(Ser63) 英文名稱(chēng): 磷酸化原癌基因c-Jun 0.1ml
Anti-CAP2 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD34(Human) 人CD34Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CYP2E1 抗細(xì)胞色素P450ⅡE1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Neurotrimin/HNT 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子HNT 規(guī)格 0.2ml
Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit 人真核翻譯起始因子3a 96T
Thymulin 英文名稱(chēng): 胸腺素 0.2ml
CTNNA1 英文名稱(chēng): α-連環(huán)蛋白(鈣粘蛋白相關(guān)蛋白)Catenin α 0.1ml
Anti-NeuN 神經(jīng)元核抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞漿型磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-p95/NBS1 (Ser343) 磷酸化DNA修復(fù)蛋白NBS1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-6 白介素6 規(guī)格 0.1ml
mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA 96T
phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) 英文名稱(chēng): 磷酸化核糖體S6蛋白激酶 0.1ml