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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4291
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4291 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
火雞源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | 50T | LZR4291 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
日光鹽場喜鹽芽孢桿菌拉丁屬名: Halobacillus yeomjeoni
賴氏毛殼拉丁屬名: Chaetomium raii
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
大腸桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
*酸熱脂環(huán)酸芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
分枝節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter ramosus
米蘭鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces mediolani
粉紅單端孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膠韌革菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
假諾卡氏屬拉丁屬名: Pseudonocardia aurantiaca
布魯氏菌 生物Ⅱ型拉丁屬名: abortus BiovarⅡ
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
韓國靈芝注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
芽胞桿菌用途: 在無機(jī)鹽培養(yǎng)基中以50mg/l的吡蟲啉為碳源培養(yǎng)，6天內(nèi)吡蟲啉降解率30%左右
火雞源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh Phospho-CRMP2 (Thr514) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2 規(guī)格 0.1ml
考馬斯亮藍(lán)G-250溶液 100ml/500ml 自產(chǎn)
ZFP219 英文名稱： 鋅指蛋白219 0.2ml
DLC1 英文名稱： 胞漿動力蛋白輕鏈1 0.2ml
PRDX6 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 鼠單抗 (FITC) Human
E2F4 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4 0.1ml
轉(zhuǎn)移生長因子–β2 Anti-TGF-β2 0.1ml
CD56 英文名稱： 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1 0.1ml
Anti-Phospho-MK1/2 (Ser221) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1/2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-RNF148 環(huán)指蛋白148Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GSTO1 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶ω1 規(guī)格 0.1ml
SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A 96T
SHANK3 英文名稱： 富含脯酸突觸相關(guān)蛋白SHANK3 0.2ml
ABAT 英文名稱： γ基丁酸轉(zhuǎn)酶 0.1ml
Anti-CD244/NKR2B4/SLAMF4/FITC 熒光素標(biāo)記CD244IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
BF(Mouse factor B) ELISA Kit 小鼠B因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD4/PE 熒光素PE標(biāo)記CD4IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EAAT3 膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白3(神經(jīng)/上皮細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白) 規(guī)格 0.1ml
Beta-HCG 人絨毛膜激素(夾心法一/二步法) 96T
MT-ND1 英文名稱： NADH復(fù)合體1 0.2ml
CTR9 英文名稱： 血小板活化因子CTR9 0.2ml
Anti-MASP 甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Pim1(Human proviral integration site 1) ELISA Kit 人前病毒整合位點(diǎn)1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IRF3 干擾素調(diào)節(jié)因子3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LHX6 轉(zhuǎn)錄因子LHX6 規(guī)格 0.2ml
TUBB(Human Beta-tubulin) ELISA kit 人β-微管蛋白 96T
PCK1 英文名稱： 磷酸烯醇酸羧激酶 0.2ml
