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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4295
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4295 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | 50T | LZR4295 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
奇異翅孢殼拉丁屬名: Emericellopsis mirabilis
異常漢遜酵母拉丁屬名: Hansenula anomala
健康兔血清規(guī)格: 0.5ml
膠孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
葉際類芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus phyllosphaerae
氮還原類芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大毛霉拉丁屬名: Mucor mucedo
頭葡萄球菌拉丁屬名: Staphylococcus capitis
鏈霉菌用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。
短小芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus pumilus
阿薩希絲孢酵母拉丁屬名: Trichosporon asahii
葡萄糖桿菌屬拉丁屬名: Gluconobacter cerinus
小笠原德克斯酵母拉丁屬名: Derxomyces boninensis
米根霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae
芬氏纖維微菌拉丁屬名: Cellulosimicrobium funkei
開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Anti-CEA 癌胚抗原單克隆(檢測(cè))Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Heat Shock Protein 90,Hsp-90 ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠絨毛膜激素(CG)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Chorionic Gonadotrophin,CG ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
PP2Ac 蛋白磷酸酶4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CD5L 英文名稱： CD5L 0.2ml
Anti-DRP3 Dystrobrevin α蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Calcitonin 大鼠降鈣素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr142) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NCF/NCF4/p40phox 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4 規(guī)格 0.1ml
Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 96T
phospho-SCNN1B(Thr615) 英文名稱： 磷酸化上皮鈉通道β2 0.1ml
小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse soluble cluster of differentiation 30,sCD30 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Soluble Endoglin,ENG/sCD105 ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble P-selectin,sP-selectin ELISA Kit特價(jià)促銷
Connexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CCL20/MIP3 alpha 巨噬細(xì)胞炎性蛋白20Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CUEDC1 英文名稱： CUE結(jié)構(gòu)域蛋白1 0.2ml
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr589/591) 磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
prolactin 小鼠催乳素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Fc gamma RII a/CD32a 免疫球蛋白G Fc段受體ⅡMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
OJ/IleRS(Human anti-OJ-antibody) ELISA Kit 人OJ/抗異亮酰tRNA合成酶 96T
phospho-SLP76 (Tyr145) 英文名稱： 磷酸化淋巴細(xì)胞胞漿蛋白2 0.1ml
