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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4304
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4304 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
綿羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4304 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
摩氏摩根菌拉丁屬名: Morganella morganii subsp. morganii
葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
華根霉拉丁屬名: Rhizopus chinensis
乙假絲酵母拉丁屬名: Candida ethanolica
水生拉恩氏菌拉丁屬名: Rahnella aquatilis
根瘤菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
解蛋白弧菌拉丁屬名: Vibrio proteolyticus
Lonsdalea quercina subsp. quercina注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
德曼鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces demainii
康寧木霉拉丁屬名: Trichoderma koningii
橄欖色青霉拉丁屬名: Penicillium olivicolor
巴氏醋桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
刺盤孢屬拉丁屬名: Colletotrichum sp.
香菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus awamori
綿羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商phospho-Caspase 6 (Ser257) 英文名稱： 磷酸化半胱胺酸蛋白酶蛋白6 0.1ml
Anti-C-jun 原癌基因蛋白/活化蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ATGA/TGAB(Human Anti-Thyroid Microsome Antibody) ELISA KIT 人抗甲狀腺球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-6R Beta/CD130/gp130 白細胞介素6受體βMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LPL/PLASTIN2 脂蛋白脂酶 規(guī)格 0.1ml
Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人載脂蛋白H 96T
TIG2 英文名稱： 視黃酸受體應(yīng)答蛋白2 0.1ml
CD7 英文名稱： CD7 0.1ml
Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser468) 磷酸化細胞核因子NF-κB p65Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MTNR1B 褪黑素受體1BMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Insig2 誘導(dǎo)基因2 規(guī)格 0.1ml
Beta2-GP1 Ab IgM(Human Beta2-Glycoprotein 1 Antibody IgM) ELISA Kit 人β2糖蛋白1IgM 96T
Phospho-PAK1(Ser199 + Ser204) + PAK2 (Ser192 + Ser197) 英文名稱： 磷酸化p21激活激酶1/2 0.1ml
ARL11 英文名稱： ADP核糖基化因子樣11 0.2ml
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-11 ELISA Kit 大鼠白介素11Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AP2 alpha/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄激活蛋白2αIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM82A1 微管動力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A 規(guī)格 0.2ml
MIS/AMH)ELISA Kit 大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素 96T
Mitochondrial ribosomal protein L11 英文名稱： 線粒體核糖體蛋白L11 0.2ml
Cux2 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2 0.1ml
Anti-Kiss-1 轉(zhuǎn)移抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A(人唾液)Multi-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-RAR Beta 維甲酸受體βMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh H9N1 Hemagglutinin A型病毒H9N1血凝素型 規(guī)格 1ml
Lp-PL-A2 ELISA Kit 大鼠脂蛋白磷脂酶A2 96T
PAGE4 英文名稱： 相關(guān)蛋白4 0.2ml
