- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4312
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-05
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4312 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
麝源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | 50T | LZR4312 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
淺絳紅鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces purpurascens
節(jié)桿菌屬拉丁屬名: Arthrobacter sp.
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
平菇注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
放射形根瘤菌用途: 固氮
炭疽芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus anthracis Cohn
玉米黑粉菌拉丁屬名: Ustilago maydis
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
浸麻類芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus macerans
泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus awamori
畢赤酵母用途: 木聚糖酶應用于食品飼料工業(yè)
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
李色鏈霉菌用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
根瘤菌屬拉丁屬名: Rhizobium pusense
麝源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應商大鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vitamin D,VD ELISA Kit進口/原裝
大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vitamin D2,VD2 ELISA Kit進口/原裝
GRK2/BARK1 (G-protein coupled receptor kinase 2) G蛋白偶合受體激酶2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
PVR CD155 / PVR 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-Crkl(Tyr244) 磷酸化接頭蛋白CrkL 規(guī)格 0.1ml
BSA蛋白標準(2mg/ml) 1ml 自產(chǎn)
ZBBX 英文名稱: 鋅指蛋白ZBBX 0.2ml
CD9 英文名稱: CD9蛋白 0.1ml
Anti-Death receptor 5/DR5/CD262 細胞調(diào)亡素/死亡受體5Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
BMP-2 小鼠骨形成蛋白-2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-FGF3/Oncogene INT2 纖維母細胞生長因子3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
HRD(Human Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素 96T
SCLT1 英文名稱: 鈉離子通道相關蛋白1 0.1ml
CD53 英文名稱: CD53 0.1ml
Anti-CYP3A4 細胞色素P450 3A4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD4 CD4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-HP1 gamma 異染色質(zhì)蛋白1-γMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHB16 原鈣粘蛋白16 規(guī)格 0.2ml
APOH Kit Human 人 Apolipoprotein H / APOH ELISA配對 ELISA
TIP47 英文名稱: 脂滴相關蛋白TIP47 0.2ml
CXCR1 英文名稱: 細胞表面趨化因子受體1 0.1ml
Anti-Nogo-A 軸索過度生長抑制因子-AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
P-PKC(Human phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 人磷酸化蛋白激酶CMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NFAM1/CNAIP NFAM1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-2 白介素2 規(guī)格 0.2ml
L-Selectin/CD62L ELISA Kit 大鼠L選擇素 96T
Phospho-Paxillin(Ser178) 英文名稱: 磷酸化樁蛋白Paxillin 0.1ml