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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4314
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4314 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
鼠源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4314 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
*芽胞桿菌（Bacillus atrophaeus）ATCC 9372；（曾用名：枯草芽胞桿菌黑色變種）規(guī)格: 10ml
炭黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
松生莖點(diǎn)霉拉丁屬名: Sydowia polyspora
長(zhǎng)雙歧桿菌拉丁屬名: Bifidobacterium longum
鴨疫里氏桿菌拉丁屬名: anatipestifer
畢赤酵母用途: 高效發(fā)酵 植酸酶
耐冷冷桿菌拉丁屬名: Cryobacterium psychrotolerans
香菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膜醭假絲酵母拉丁屬名: Candida membranifaciens
咸海鮮芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus jeotgali
病毒拉丁屬名: Infectious bronchitis virus
弗雷德里克斯堡假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
紫紅曲霉拉丁屬名: Monascus purpureus
環(huán)形泰勒蟲(chóng)（安西株）拉丁屬名: annulata
中間根瘤菌屬拉丁屬名: Mesorhizobium shangrilense
鼠源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格ABCD4 英文名稱(chēng)： 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4 0.2ml
Anti-CD8/RBITC 羅丹明標(biāo)記CD8IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
aFGF-1 ELISA Kit 大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-APP(phospho Thr668) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白(p-APP Thr668)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM46D/CT112 /抗原112 規(guī)格 0.2ml
IL-1(Human Interleukin 1) ELISA Kit 人白介素1 96T
MLCK 英文名稱(chēng)： 肌球蛋白輕鏈激酶 0.1ml
CD94/KLRD1 英文名稱(chēng)： NK細(xì)胞表面抑制性受體CD94 0.2ml
Anti-NKG2C NK細(xì)胞受體2CMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體1AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MPO 髓過(guò)氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin alpha E2 整合素alpha E2 規(guī)格 0.1ml
HBcAb(Human anti-hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 人核心 96T
Pan Cytokeratin 英文名稱(chēng)： 廣譜細(xì)胞角蛋白PCK 0.1ml
CATSPER3 英文名稱(chēng)： 陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白3 0.2ml
Anti-phospho-Bcl 10(Ser218) 磷酸化Bcl-10Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
E4F1 英文名稱(chēng)： E4F轉(zhuǎn)錄因子1 0.2ml
瓜氨酸環(huán)肽 Anti-CCP 0.1ml
Anti-URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記病毒X蛋白(HBxAg)C端IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1.4(Ser27) 磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白 規(guī)格 0.1ml
CD146/MCAM 細(xì)胞粘附分子CD146抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CXCR3 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞表面趨化因子受體3 0.1ml
Anti-Calpain 1 鈣蛋白酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HIV(Human anti-immunodeficiency virus antibody) ELISA Kit 人抗人類(lèi)病毒Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MAD1 Mad1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ketohexokinase 肝果糖激酶 規(guī)格 0.2ml
sRANKL ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基 96T
PRDX5+PRDX6 英文名稱(chēng)： 過(guò)氧化還原酶5/6 0.1ml
