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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4327
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4327 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
鱈魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | 50T | LZR4327 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
土曲霉拉丁屬名: Aspergillus terreus Thom
納地青霉拉丁屬名: Penicillium nalgiovense
凍干粉 產(chǎn)氣莢膜梭菌計(jì)數(shù)注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
葡萄座腔菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
粉狀畢赤酵母拉丁屬名: Pichia farinosa
Bacillus siamensis 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
pBluescript II拉丁屬名: pBluescript II
產(chǎn)黃青霉拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Monilinia fructicola
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida tropicalis
黃隱球酵母拉丁屬名: Cryptococcus flavus
哈茨木霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
檸檬兩面神菌拉丁屬名: Janibacter melonis
鱈魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit進(jìn)口/原裝
adiponectin(humen) 人脂聯(lián)素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CK20 細(xì)胞角蛋白20Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NRP1/CD304 神經(jīng)纖毛蛋白1 規(guī)格 0.1ml
processing solution 顯影液試劑 200ml
TRF2 英文名稱： 端粒結(jié)合蛋白2 0.1ml
C7orf10 英文名稱： 7號(hào)染色體開放閱讀框10 0.2ml
CDC27 英文名稱： 后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3 0.1ml
Anti-Gelsolin 凝溶膠蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
sE-selectin(Human soluble E-selectin) ELISA Kit 人可溶性E選擇素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-GDF8/MSTN 生長分化因子8Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
cTn- I (Human cardiac troponin I ) ELISA Kit 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ 96T
Phospho-RSK2(Tyr529) 英文名稱： 磷酸化核糖體S6激酶RSK2 0.1ml
ATF6 英文名稱： 活化轉(zhuǎn)錄因子6 0.1ml
Anti-Phospho-Na,K-ATPase alpha-1 (Tyr10) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit 小鼠脂聯(lián)素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD117/FITC 熒光素標(biāo)記CD117IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit 小鼠絲酸/蘇酸蛋白磷酸酶 96T
MIER2 英文名稱： 中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2 0.2ml
Cyclin C 英文名稱： 周期素C 0.1ml
Anti-Nm23-H2 抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Human Lyme IgG ELISA Kit 人萊姆IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Integrin beta 1/CD29 整合素β1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LEF-1 淋巴增強(qiáng)因子-1 規(guī)格 0.1ml
TSH(Human Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 人促甲狀腺素 96T
PACRG 英文名稱： 麻瘋病和共同調(diào)節(jié)蛋白 0.2ml
