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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4331
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4331 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
魚(yú)源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | 50T | LZR4331 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
根瘤菌用途: 固氮
乳桿菌屬拉丁屬名: Lactobacillus sp.
松口蘑注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
島青霉拉丁屬名: Penicillium islandicum
宛氏擬青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
潘諾尼亞鎖霉拉丁屬名: Itersonilia pannonica
卵形巴貝斯蟲(chóng)（盧氏株）拉丁屬名: ovata
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli ETEC O25：K19
金黃色葡萄球菌拉丁屬名: aureus
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素A型拉丁屬名: perfringens Type A
葛氏沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia grimesii
熒光威克酵母用途: 模式菌株
層出鐮孢菌拉丁屬名: Fusarium proliferatum
宇佐美曲霉拉丁屬名: Aspergillus usamii
魚(yú)源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)英文名稱： 0.2ml
AVEN 英文名稱： 細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑) 0.1ml
Anti-Aurora B/FITC 熒光素標(biāo)記極光激酶BIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
EphA2 英文名稱： 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪酸激酶 0.1ml
核糖核蛋白抗原SSA Anti-SSA/RO 0.1ml
Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化生成素受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8 規(guī)格 0.1ml
CDC37L1 英文名稱： 細(xì)胞分裂周期37樣蛋白1 0.2ml
Anti-FGFR3/CD333 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MIP-1 Gamma 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1γMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-factor VIII(FVIII) 第八因子相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MRC1/CD206 巨噬細(xì)胞甘露糖受體 規(guī)格 0.2ml
VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit 人維生素D受體 96T
STK25 英文名稱： 絲酸/蘇酸激酶25 0.2ml
EDNRA 英文名稱： 內(nèi)皮素受體A 0.1ml
孕激素誘導(dǎo)阻斷因子 Anti-PIBF 0.2ml
Anti-STAT3 /FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MYL6(Tyr29+Ser30) 磷酸化肌球蛋白輕鏈6 規(guī)格 0.1ml
GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 英文名稱：Human serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒 英文名稱：Human serine protease，PRSS ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
Cyclin E 英文名稱： 周期素E 0.1ml
Anti-NKG2D/CD314 NK細(xì)胞受體2DMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
M-CSF ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-Akt/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化蛋白激酶BIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXL15 FBXL15蛋白 規(guī)格 0.2ml
PGF2 Alpha ELISA Kit 大鼠素F2α 96T
PRAK 英文名稱： p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激酶 0.2ml
