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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4334
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4334 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
榛子源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4334 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
麥芽糖假絲酵母拉丁屬名: Candida maltosa
根瘤菌用途: 具固氮功能
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
古巴栓孔菌拉丁屬名: Trametes cubensis
中溫富鹽菌拉丁屬名: Haloferax? ?mediterranei
油梨苗枯萎注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter psychrochitiniphilus
佛羅里達(dá)側(cè)耳、蠔菇拉丁屬名: Pleurotus florida Sing.
短雙歧桿菌拉丁屬名: Bifidobacterium breve
盤多毛孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
麥芽糖假絲酵母拉丁屬名: Candida maltosa
黃曲霉拉丁屬名: Aspergillus flavus
榛子源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格Rhesus antibody Rh Phospho-Lamin A/C(Ser22) 磷酸化核纖層蛋白A/C 規(guī)格 0.1ml
P53 抑制基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
人抗心磷脂IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒英文名稱：Human anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人抗心磷脂IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Human anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit特價(jià)促銷
人抗信號(hào)識(shí)別顆粒(SRP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human signal recognization particle antibody,SRP ELISA Kit特價(jià)促銷
人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 英文名稱：Human anti-thymocyte globulin,ATG ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人抗血小板IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒英文名稱：Human platelet antibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A ELISA Kit特價(jià)促銷
CDC42 英文名稱： 細(xì)胞分化周期CDC42蛋白 0.1ml
Anti-NHE1 鈉氫通道蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LPO(Human lipid peroxlde) ELISA Kit 人/乳過(guò)氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NGX6 細(xì)胞相關(guān)基因6Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-17 白介素-17 規(guī)格 0.1ml
Human anti-IVIgG antibody ELISA Kit 人抗IVIgG 96T
PTPN7 英文名稱： 非受體型蛋白酪酸磷酸酶7 0.2ml
VAMP2 英文名稱： 囊泡相關(guān)膜蛋白2 0.2ml
DOCK7 英文名稱： 胞質(zhì)分裂專一蛋白7 0.2ml
Anti-AMPK beta 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ELYS 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白 0.2ml
軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子受體/Nogo受體 Anti-Nogo R/NGR 0.1ml
Anti-SIP1 /FITC 熒光素標(biāo)記運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Thr81) 磷酸化抑制基因P53 規(guī)格 0.1ml
Cyclin G 英文名稱： 周期素G 0.1ml
Anti-IL-17R/IL-17RA/CD217 白介素17受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AMA(Human Anti-myocardial antibody) ELISA Kit 人抗心肌Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-7 白介素7Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LPP/LIM protein 相關(guān)蛋白 規(guī)格 0.1ml
PWM(Human poke* mitogen) ELISA Kit 人美洲商陸素 96T
RAB7 英文名稱： RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AB7 0.1ml
