![]() |
- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4119
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-05
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4119 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
鏈球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Streptococcus pneumoniae | LZR4119 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
大豆莖菌LP-a (Lipoprotein a) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
泛養(yǎng)副球菌FAS/CD95/TNFRSF6 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 拉丁屬名: Paracoccus pantotrophus
百脈根中間根瘤菌OSM (Oncostatin M) ELISA Kit 拉丁屬名: Mesorhizobium loti
赭色擲孢酵母PS (Plasma Anticoagulant Protein S) ELISA Kit拉丁屬名: Sporobolomyces salmonicolor
球形阜孢TARS (Threonyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit拉丁屬名: Papularia sphaerosperma
枯草芽孢桿菌ATF-3 (Activating Transcription Factor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
地衣芽孢桿菌NFKBIE (Nuclear Factor Of Kappa Light Polypeptide Gene Enhancer In B-cells Inhibitor Epsilon) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus licheniformis
類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種C8g (Complement Component 8g) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus paracasei subsp. paracasei
嗜鹽喜鹽芽胞桿菌VEGFR-2/KDR (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
窄食單胞菌ANGPTL3 (Angiopoietin Like Protein 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
串珠鐮孢Fcγ (Fc Fragment of IgG) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium moniliforme
約氏不動(dòng)桿菌TD-Ag (Thymus Dependent Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter johnsonii
固氮菌CGα (Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide) ELISA Kit用途: 固氮。
韓國(guó)游動(dòng)微菌KERA (Keratocan) ELISA Kit拉丁屬名: Planomicrobium koreense
單格孢屬AIF (Apoptosis Inducing Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鏈球菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)ALDH9A1 英文名稱(chēng): γ-基丁酸醛脫氫酶 0.2ml
Anti-ASIC1/BNaC2/FITC 熒光素標(biāo)記酸敏感離子通道1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TGF- Beta1 ELISA kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、、兔、豬有絲分裂激酶BIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EXPB-2 植物延展素-β 規(guī)格 1ml
MIGF/CXCL9(Human monocyte interferon gamma inducing factor) ELISA Kit 人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子 96T
MMP-9 英文名稱(chēng): 基質(zhì)金屬蛋白酶9 0.1ml
CCDC160 英文名稱(chēng): 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白160 0.2ml
Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser80) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
TBA(Human Total bile acide) ELISA Kit 人總膽汁酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MAP3K8/TPL2 原活化蛋白激酶激酶8Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KCNK9/KCNK3 酸敏感鉀離子通道蛋白3 規(guī)格 0.1ml
ACTH ELISA Kit 大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素 96T
PAS1C1 英文名稱(chēng): 核纖層蛋白A相關(guān)結(jié)構(gòu)蛋白1 0.2ml
NOV Kit Human 人 CCN3 / NOV / IGFBP9 ELISA配對(duì) ELISA
TPA 英文名稱(chēng): 組織型纖溶酶原激活劑 0.1ml
CD86 英文名稱(chēng): CD86 0.1ml
Anti-CD163/M130 CD163Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Porcine Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit進(jìn)口/原裝
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Porcine Cortisol ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CNTF Receptor alpha 英文名稱(chēng): 睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α 0.1ml
Anti-phospho-NFKB p65 (Ser536) 磷酸化細(xì)胞核因子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PLAP(Human Placental alkaline pkosphatase) ELISA Kit 人胎盤(pán)堿性磷酸酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-NPM (Thr95) 磷酸化核仁磷酸蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IGSF21 免疫球蛋白超家族成員21 規(guī)格 0.2ml
AsAb ELISA Kit 大鼠抗 96T
Phospho-PTEN(Ser385) 英文名稱(chēng): 磷酸化抑制基因PTEN 0.1ml