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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4231
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4231 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
溶藻弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Vibrio alginolyticus | LZR4231 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
孟氏假單胞菌DHVD3 (1,25-Dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
HIV假病毒 Z20-11VD4 (Vitamin D4) ELISA Kit規(guī)格: 1mL
紡錘形賴氨酸芽孢桿菌VE (Vitamin E) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus fusiformis
卷枝毛霉VK1 (Vitamin K1) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor circinelloides
巨型艾美耳球蟲MEK (Methionine-Enkephalin) ELISA Kit 拉丁屬名: maxima
谷氨酸棒桿菌LEK (Leucine-Enkephalin) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
草菇PGI2 (Prostacyclin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
金黃色葡萄球菌ACSDKP (N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
銅綠假單胞菌HYD (Hydrocortisone) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
構(gòu)巢曲霉LPS (Lipopolysaccharides) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus nidulans
家園鬼傘GSH (Glutathione) ELISA Kit用途: 資源真菌
杏鮑菇LAM (Lipoarabinomannan) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蘇云金芽孢桿菌8-OHdG (8-Hydroxydeoxyguanosine) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
熱帶頭梗霉OT (Oxytocin) ELISA Kit拉丁屬名: Cephaliophora tropica
香蕉Cortisol ELISA Kit用途: 植物病原菌
溶藻弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit進口/原裝
大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit進口/原裝
大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit進口/分裝
ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 磷酸化雌激素受體α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
極光激酶B Anti-Aurora B 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Thr693) 磷酸化表皮生長因子受體 規(guī)格 0.1ml
D-MEM/F-12培養(yǎng)基(原裝) 10×1L Gibco
CD2 英文名稱： CD2 0.1ml
Anti-DNA PKcs DNA依賴蛋白激酶催化亞基Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
M-CSFR(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR) ELISA Kit 人巨噬細胞集落刺激因子受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FOXJ1/HFH-4 叉頭蛋白J1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
SM(Human sphingomyelin) ELISA Kit 人鞘磷脂 96T
SP-A 英文名稱： 肺表面活性蛋白A 0.1ml
CHCHD5 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD5 0.2ml
Anti-CD72/Ly-32 CD72蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Bmi1/PCGF4 組蛋白相關(guān)Bmi1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PGBD3 PGBD3蛋白 規(guī)格 0.2ml
EGFR 表皮生長因子受體 濃縮液 0.1ml 進口分裝
THEG4/C1orf223 英文名稱： 高表達蛋白4 0.1ml
Crkl 英文名稱： 接頭蛋白CrkL 0.2ml
Anti-PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit 人谷胱甘肽過氧化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MC-1R 黑皮質(zhì)素-1受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Junctophilin 3 連接蛋白JPH3 規(guī)格 0.2ml
ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit 人腺病毒抗原 96T
phospho-p107(Thr369) 英文名稱： 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤樣蛋白p107 0.1ml
