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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4263
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4263 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
乳酸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | LZR4263 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
粘質(zhì)沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia marcescens
褶皺曲霉拉丁屬名: Aspergillus rugulosus
產(chǎn)灰色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces cinerochromogenes
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
檸條根瘤菌用途: 與檸條共生固氮
檸檬兩面神菌拉丁屬名: Janibacter melonis
粉紅聚端孢霉用途: 代謝產(chǎn)物
松杉靈芝注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
雙孢蘑菇拉丁屬名: Agaricus bisporus
雙孢蘑菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
榛針孢酵母拉丁屬名: Nematospora coryli
平菇—465用途: 食用菌
玫瑰單胞菌拉丁屬名: Roseomonas eburnea?sp. nov.
糙皮側(cè)耳拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
乳酸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書C8orf58 英文名稱： 8號(hào)染色體開放閱讀框58 0.2ml
Anti-CK7 細(xì)胞角蛋白7Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AVP Human 人抗激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CITED1/ABCC1 結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NR1/NMDAR1 谷氨酸受體1 規(guī)格 0.1ml
Goat serum 封閉用正常山羊血清(原液) 5ml
THOC2 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子THOC2 0.2ml
CD38 英文名稱： CD38 0.1ml
Anti-NeuroD1 神經(jīng)元分化因子1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 小鼠角化細(xì)胞因子/雙調(diào)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-BSP/FITC 熒光素標(biāo)記骨涎蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EpCAM/CD326 上皮特異性抗原 規(guī)格 0.1ml
D2D (Rabbit D-Dimer) ELISA Kit 兔子D二聚體 96T
phospho-p38 MAPK (Tyr323) 英文名稱： 磷酸化p38MAPK 0.1ml
DAPL1 英文名稱： 凋亡相關(guān)蛋白激酶樣蛋白1 0.2ml
細(xì)胞死亡調(diào)解子 Anti-Bim 0.1ml
EFR3A 英文名稱： EFR3A蛋白 0.2ml
Toll樣受體2 Anti-TLR2 0.1ml
Anti-TNFAIP3 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-KCNC1(Ser503) 磷酸化離子通道蛋白Kv3.1 規(guī)格 0.1ml
PDGF-R-B 血小板源性生長因子受體-B(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CST9 英文名稱： 胱抑素9/半胱酸蛋白酶抑制劑9 0.2ml
Anti-phospho-FAK (Ser732) 磷酸化粘著斑激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬基質(zhì)蛋白酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ADRB2 (Ser261) 磷酸化腎上腺素能受體β2 規(guī)格 0.1ml
Macrophage 巨噬細(xì)胞 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
SLC22A11 英文名稱： 尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1 0.2ml
