|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4271
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4271 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
大豆源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | 50T | LZR4271 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
畢赤酵母用途: 高效發(fā)酵 植酸酶
硬柄小皮傘用途: 可食用；可能為草坪菌根真菌。
*蜜環(huán)菌用途: 食藥用菌
孟氏假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
禾谷鐮孢拉丁屬名: Fusarium graminearum
金耳用途: 屬外生菌根菌
變異短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas variabilis
橄欖色盤多毛孢拉丁屬名: Pestalotia olivacea
糞鏈球菌用途: 乳酸菌制劑，可用于飼料添加劑、青貯飼料等
羊肚菌用途: 食用、藥用
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
臺(tái)灣根霉拉丁屬名: Rhizopus formosensis
長(zhǎng)雙歧桿菌長(zhǎng)亞種拉丁屬名: Bifidobacterium longum subsp. longum
細(xì)孢毛霉拉丁屬名: Mucor subtilissimus
大豆源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書大鼠可溶性相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒英文名稱：Rat soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA Kit進(jìn)口/原裝
GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
L1CAM CD171 / N-CAML1 / L1CAM 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh Phospho-Cyclin B1(Ser133) 磷酸化周期素B1 規(guī)格 0.1ml
Western轉(zhuǎn)膜液 1L 自產(chǎn)
Zic2 英文名稱： 鋅指蛋白Zic2 0.2ml
DAZ1 英文名稱： 缺失基因1 0.2ml
CD4 英文名稱： CD4 0.1ml
Anti-phospho-ERK1(Thr202/Thr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti- Alpha-IFN-b (humen) 抗大鼠α干擾素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Dnmt3a DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NCoR1 核受體輔助抑制因子1 規(guī)格 0.1ml
Human Anti-Thrombin III ,AT- III ELISA Kit 人抗凝血酶Ⅲ 96T
SIRT1 英文名稱： 沉默調(diào)節(jié)蛋白1 0.1ml
BTG4 英文名稱： B細(xì)胞遷移基因4 0.2ml
Anti-phospho-STAT1 (Tyr701) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
IL-32 ELISA Kit 大鼠白介素32Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-Synapsin I (Ser9) 磷酸化神經(jīng)突觸素1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit 人胚胎性硫糖蛋白抗原 96T
NCE2 英文名稱： 泛素結(jié)合酶E2F 0.2ml
CTAG1B 英文名稱： /抗原1B 0.2ml
Anti-Pectinesterase 果膠酶Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
St-Ag(Human Salmonella typhi antigen) ELISA Kit 人傷寒抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-IRS1(Tyr895) 磷酸化受體底物-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Leptin 瘦素 規(guī)格 0.1ml
F-TESTO(Human Free Testoterone) ELISA Kit 人游離睪酮 96T
PHF8 英文名稱： 組蛋白賴酸去甲基化酶PHF8 0.2ml
