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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 人細(xì)胞；HCC1937

形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 這株細(xì)胞1995年10月13日最初來源于原發(fā)性導(dǎo)管癌,用了11.5個月建株。分類為TNMIIB期,3級。BRCA1分析表明這株細(xì)胞是BRCA15382C突變純合的,而來源于同一的類淋巴母細(xì)胞細(xì)胞株在這個突變位點上是雜合的。另兩個家庭成員也有這個突變;一個同卵雙生姐妹也患有。這株細(xì)胞有一個后天的TP53突變,而其野生型等位基因丟失;一個PTEN基因的后天的純合缺失,以及多個與機理相關(guān)的位點上發(fā)生的雜合突變。這株細(xì)胞Her2-neu和p53表達(dá)都呈陰性。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法: 消化5-10分鐘。1:2。4-5天長滿。

傳代情況: P(15+5)

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

Rhynchosporium secalis (Oudemans) Davis, an ..細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；231-Cas9-549 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；2ug/mlPuromycin

Bacillispora aquatica Nilsson細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；231-Cas9-551 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；2ug/mlPuromycin

Taphrina robinsoniana Giesenhagen細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；231-Cas9-552 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；2ug/mlPuromycin

Homo sapiens, human細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；PANC-1-Cas9-554 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；400ug/mlG418

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細(xì)胞名稱: TSC22敲除的人細(xì)胞；231-Cas9-TSC22KO-553 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；400ug/mlG418

Staphylococcus aureus subsp.aureus bacte ..細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；PANC-1-Cas9-557 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；400ug/mlG418

Homo sapiens, human lung細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；PANC-1-Cas9-556 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；400ug/mlG418

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；PANC-1-Cas9-558 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；400ug/mlG418

Homo sapiens, human細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；PANC-1-Cas9-555 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；400ug/mlG418

Blastomyces sp.細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；400ug/mlG418

Geotrichum capitatum (Diddens et Lodder) vo ..細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-561 McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS；400ug/mlG418

Halogeometricum borinquense Montalvo-Rodrig ..細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562 McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS；400ug/mlG418

Rhizoctonia repens Bernard, anamorph細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-560 McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS；400ug/mlG418

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-564 McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS；400ug/mlG418

frozen細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-563 McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS；400ug/mlG418

Homo sapiens, human細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT116-Cas9-565 IMDM:Iscove＇sModiefiedDulbecco＇sMedium10%FBS；2ug/mlPuromycin
人細(xì)胞；HCC1937供應(yīng)商解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒TFRELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒TFRELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒TGABELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

B細(xì)胞因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒TGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒TGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒TGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒TGF-αELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

抗原(BTA)ELISA試劑盒TGF-αELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。