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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZX7528
- 發(fā)布日期: 2020-12-07
- 更新日期: 2025-02-12
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZX7528 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮樣 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | A型 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 株 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
細(xì)胞名稱 突變型Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;HepG2-mCas9-721
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HepG2細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)突變型的Cas9蛋白,該蛋白可以降低基因編輯時的脫靶效率,經(jīng)2.0ug/mlPuromycin篩選得到的單,經(jīng)WesternBlotting驗證該可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA;2.0ug/mlPuromycin
傳代方法: 1:4~1:6傳代;每周2次。
傳代情況:
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。
產(chǎn)品名稱 | 突變型Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;HepG2-mCas9-721供應(yīng)商 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | LZX7528 |
傳代方法:
產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。
(二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
注意事項:
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
VD3ELISAKit大鼠維生素D3 規(guī)格:50mg
Alpha-FodrinIgG/IgA(Mouseanti-alpha-FodrinIgG/IgA)ELISAKit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA 規(guī)格:0.2ml
LKM(Humanliverkidneymicrosomeautoantibody)ELISAKit人抗肝腎微粒體抗體 規(guī)格:20mg
IFNAlpha-Ab(HumanInterferonAlphaAntibody)ELISAKit人抗α干擾素抗體 規(guī)格:20mg
VD2ELISAKit大鼠維生素D2 規(guī)格:1g
AT-III(MouseAnti-ThrombinIII)ELISAKit小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體 規(guī)格:0.2ml
NP-Y(MouseneuropeptideY)ELISAKit小鼠神經(jīng)肽Y 規(guī)格:5g
Sc1-70-Ab(HumanSc1-70Antibody)ELISAKit人抗Sc1-70抗體 規(guī)格:2.5g
VEELISAKit大鼠維生素E 規(guī)格:20mg
GHRP(MouseGrowthHormoneReleasingPeptide)ELISAKit小鼠生長激素釋放多肽 規(guī)格:50mg
Jo1/HRS(HumanJo-1Antibody)ELISAKit人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體 規(guī)格:5g
VAELISAKit大鼠維生素A 規(guī)格:20mg
RNP-Ab(Humananti-ribonucleoproteinAntibody)ELISAKit人抗核糖核蛋白抗體 規(guī)格:50mg
Gelsolin(MouseGelsolin)ELISAKit小鼠凝溶膠蛋白 規(guī)格:2.5g
Beta-TGELISAKit大鼠β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白 規(guī)格:1g
突變型Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;HepG2-mCas9-721供應(yīng)商苦杏仁苷29883-15-6中文別名:扁桃苷
英文名:Amygdalin
英文別名:Nitrilosides
CAS登錄號:29883-15-6
分子式:C20H27NO11
分子量:457.42
分子結(jié)構(gòu):
外觀:斜方柱狀結(jié)晶
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:薔薇科植物東北苦杏仁的干燥成熟的種子。
溶解性:易溶于沸水,幾乎不溶于。
熔點:200℃
:苦杏仁苷有控制及。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年