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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗小鼠巨噬細(xì)胞)；F4/80

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 可產(chǎn)生抗小鼠巨噬細(xì)胞的單抗體Mac-2

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況: PN

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

Acc65I (Asp718I)　　5000 units顆粒溶素抗體

Acc65I (Asp718I)　　1000 unitsγ谷酰羧化酶抗體

96孔 PCR板密封蓋　　細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基2抗體

Lambda DNA/EcoRI Marker　　高爾基體膜相關(guān)蛋白6抗體

1000 μl 硅化吸頭 袋裝　　γ基丁受體相關(guān)蛋白樣1抗體

AntiαPTP Mab　　法尼基二合酶1抗體

GeneRuler 1kb DNA Ladder, readytouse　　鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白1抗體

GeneRuler 1kb DNA Ladder　　G蛋白偶聯(lián)受體64抗體

GeneRuler 1kb DNA Ladder　　高爾基體自身蛋白GM130抗體

GeneRuler 1kb DNA Ladder　　糖代謝相關(guān)蛋白1抗體

O`RangeRuler 100bp+500bp DNA Ladder, readytouse　　G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2抗體

鼠抗人CD40b/ CD61單抗　　G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體

O`RangeRuler 500bp DNA Ladder, readytouse　　細(xì)胞周期蛋白G相關(guān)激酶抗體

O`RangeRuler 200bp DNA Ladder, readytouse　　半乳糖凝集素相關(guān)蛋白A抗體

O`RangeRuler 100bp DNA Ladder, readytouse　　半乳糖凝集素12抗體

O`GeneRuler 100 bp Plus DNA Ladder, readytouse　　γ基丁運(yùn)載蛋白3抗體

O`GeneRuler 100bp DNA Ladder, readytouse　　促進(jìn)成骨細(xì)胞分化因子抗體
小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗小鼠巨噬細(xì)胞)；F4/80說明書Sulfameter　磺胺-5-甲氧嘧啶(98%)　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Amitraz　雙甲脒（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Amitraz　雙甲脒　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Citricacidmonohydrate　檸檬酸一水　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Salubrinal　Salubrinal　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Primaquinephosphate　磷酸伯安喹；磷酸伯氨喹　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

D-(-)-Luciferin　D-熒光素,蟲熒光素　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Marbofloxacin　麻保沙星;馬波沙星　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IbutamorenMesylate,MK-0677　MK0677，伊布莫侖甲磺酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Agar　瓊脂粉　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Trifluridine;Trifluorothymidine　三氟胸苷;三氟尿苷(TFT)　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Cocarboxylasetetrahydrate　四水合輔羧酶;四水合硫胺焦磷酸酯　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Gatifloxacinmesylate　甲磺酸加替沙星　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Perospironehydrochloride　鹽酸哌羅匹隆　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Tirapazamine(SR259075;Win59075;SR4233)　替拉扎明　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR