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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 急性髓系細(xì)胞細(xì)胞；KG-1

形態(tài)特性: 原粒細(xì)胞

生長特性: 懸浮生長

特征特性: KG1細(xì)胞系由H.P.Koeffler和D.W.Golde建立。骨髓抽自一個59歲的患有紅而后又發(fā)展成急性骨髓原性的男性白人。KG1細(xì)胞在形態(tài)上類似急性髓原，表現(xiàn)為明顯的多形化，骨髓母細(xì)胞和骨髓細(xì)胞占優(yōu)勢。少量細(xì)胞是成熟的粒細(xì)胞，也有微量的巨噬細(xì)胞和嗜曙紅細(xì)胞。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: PN

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

4-硝基-L-苯丙氨酸4-Nitro-L-phenylalanine207591-86-4

4-硝基芐瞇鹽酸鹽4-NitrobenziMidaMide15723-90-7

4-硝基兒茶酚4-NITROCATECHOL質(zhì)量規(guī)格：>98.0%

4-硝基兒茶酚4-NITROCATECHOL質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%

4-硝基磺胺甲惡唑4-Nitro29699-89-6

4-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Nitrophthalonitrile質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

4-硝基芘(>97.0%(HPLC))4-Nitropyrene質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)

4-溴甲基-6,7-二甲氧基香豆素(>98.0%(HPLC))4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

4-溴芘(>95.0%(GC))4-Bromopyrene質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

4-亞硝基磺胺甲惡唑4-Nitroso131549-85-4

4-鹽酸差向四環(huán)素4-Epitetracycline23313-80-6

4-氧代維甲酰酚胺3-Keto865536-65-8

4-氧*度酸4-Oxo111478-86-5

4'-乙酰苯并-15-冠-5-醚(>95.0%(GC))4'-Acetylbenzo-15-crown41757-95-3

4-乙酰氧基它莫西芬4-Acetoxy76117-69-6
急性髓系細(xì)胞細(xì)胞；KG-1供應(yīng)商Melezitosehydrate　松三糖　質(zhì)量規(guī)格：>98%,MAO-Bselectiveinhibitor

PEG20000　聚乙二醇20000　質(zhì)量規(guī)格：>98%，MEK1/2抑制劑

2-Aminothiazole　2-氨基噻唑(>98%，BR)　質(zhì)量規(guī)格：>98%,MEK抑制劑

Cerium(III)chloride,heptahydrate　氯化鈰七水　質(zhì)量規(guī)格：>98%,MGMT的抑制劑

D(+)-Arabitol　D-阿拉伯糖醇(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>98%,MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑

D(+)-Arabitol　D-阿拉伯糖醇　質(zhì)量規(guī)格：>98%,MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑

Metol　米吐爾(>98%,BC)　質(zhì)量規(guī)格：>98%,p38MAPK抑制劑

Pyridoxalhydrochloride　鹽酸吡哆醛　質(zhì)量規(guī)格：>98%,PDE4和TNF-α抑制劑

Siliconeoil　硅油　質(zhì)量規(guī)格：>98%,PI3Kγ/δ抑制劑

Sodiumbromide　溴化鈉　質(zhì)量規(guī)格：>98%,PIKfyve抑制劑

Sodiumhexametaphosphate　六偏磷酸鈉　質(zhì)量規(guī)格：>98%,Pim1抑制劑

Albumin,frombovinepH7.0Fattyfree　無脂肪酸牛血清白蛋白　質(zhì)量規(guī)格：>98%,PractGrade

Diaphorase　心肌黃酶(>30U/mg,BR)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，proteasome抑制劑

Digitonin-water-soluble　水溶毛地黃皂苷　質(zhì)量規(guī)格：>98%,P糖蛋白抑制劑

DSP　DSP　質(zhì)量規(guī)格：>98%,P-糖蛋白抑制劑