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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

細(xì)胞名稱 人永生化淋巴細(xì)胞；CNLMG-B5538LC

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C7

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

DL-叔亮氨酸DL-tert-Leucine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

DL-絲氨酸DL-Serine質(zhì)量規(guī)格：>98%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

DL-蘇氨酸DL-Threonine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

DL-天冬氨酸DL-Aspartic617-45-8

DL-天冬酰胺，一水DL-Asparagine3130-87-8

DL-硒代蛋氨酸(USP)DL-Selenomethionine質(zhì)量規(guī)格：>98%(HPLC),USP

DL-纈氨酸DL-Valine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

DL-異亮氨酸DL-Isoleucine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

DL-正纈氨酸DL-Norvaline質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

DL-正纈氨酸DL-Norvaline質(zhì)量規(guī)格：0.99

DL-組氨酸DL-Histidine質(zhì)量規(guī)格：0.98

DL-組氨酸鹽酸鹽DL-Histidine·HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,一水物，BR

DMPDMP質(zhì)量規(guī)格：BR

DMSDMS質(zhì)量規(guī)格：BR

DMT保護(hù)性-2'-氟脫氧尿苷DMT-2'-F-dU質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
人永生化淋巴細(xì)胞；CNLMG-B5538LC價(jià)格OrangeⅠ　橙黃Ⅰ　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

PatentBlueVF　專利藍(lán)VF　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Phenolphthalein　酚酞(IND)　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Potassiumiodidesolution　碘化鉀溶液(100g/L)　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Potassiumiodidesolution　碘化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N))　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Rosolicacid　玫紅酸(AR)　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Rosolicacid　玫紅酸(指示劑級(jí))　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Sodiumoxalatesolutionforvolumetricanalysis　草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Thymolblue　百里香酚藍(lán)(IND)　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Thymolblue　百里香酚藍(lán)(ACSreagent,95%)　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

QuinaldineRed　喹哪啶紅　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Phenolphthalein　酚酞(98%)　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Tetrabromophenolblue　四溴酚藍(lán)　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Thymolphthalein　百里香酚酞　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

Thorin　釷試劑　質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)