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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 小鼠細(xì)胞；HcLF8

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體英文縮寫：SLC22A6C20H34O3≥95%

陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3抗體英文縮寫：OAT-3C30H46O4≥95%

催產(chǎn)素受體(縮宮素受體)抗體英文縮寫：Oxytocin RC21H24O6≥95%

緊密連接蛋白抗體英文縮寫：OCLNC27H30O15≥98%

免疫反應(yīng)抗原抗體英文縮寫：OCIAD1C15H22O5≥98%

大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體英文縮寫：OMPCC27H30O14≥98%

神經(jīng)叢蛋白B1抗體英文縮寫：Plexin B1C15H10O6≥98%

磷酸化蛋白激酶C(T410)抗體英文縮寫：phospho-PRKCZ(Thr410)C21H16O9≥95%

磷酸化蛋白激酶C mu型抗體英文縮寫：phospho-PRKD1(Ser738)C18H16O6≥95%

磷酸化蛋白激酶C mu型抗體英文縮寫：phospho-PRKD1(Tyr463)C27H30O15≥95%

細(xì)胞表面受體PILRβ抗體英文縮寫：PILR betaC27H30O15≥98%

相關(guān)蛋白4抗體英文縮寫：PAGE4C20H18O10≥96%

線粒體導(dǎo)肽水解酶β抗體英文縮寫：PMPCBC21H20O10≥95%

富含脯氨酸蛋白15抗體英文縮寫：PRR15C23H18O10≥98%

維生素K依賴的蛋白C輕鏈抗體英文縮寫：protein C light chainC27H30O16≥98%
小鼠細(xì)胞；HcLF8價(jià)格7-Amino-4-methylcoumarin　香豆素120；7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)　質(zhì)量規(guī)格：≥19000IU/mg,EP6

IPI-145(INK1197)　Duvelisib(IPI-145)　質(zhì)量規(guī)格：≥2000KU/mgprotein,(牛胰)

X-NeuNAc　5-溴-4-氯-3吲哚神經(jīng)氨酸鈉鹽　質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mgprotein,sigma分裝

N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol　ABEI；N-（4-氨丁基）-N-乙基異魯米諾　質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mgprotein,sigma原裝

Tetradecyltrimethylammoniumchloride　TTAC；十四烷基三甲基氯化銨　質(zhì)量規(guī)格：≥3TIU/mg,進(jìn)分,來源:牛肺或牛胰

Dodecyltrimethylammoniumchloride(DTAC)　DTAC；十二烷基三甲基氯化銨　質(zhì)量規(guī)格：≥40%

CTAC　CTAC;十六烷基三甲基氯化銨　質(zhì)量規(guī)格：≥40%澄清淡黃色液體

StearylTrimethylAmmoiumChloride(STAC)　十八烷基三甲基氯化銨　質(zhì)量規(guī)格：≥50%,BR

Decyltrimethylammoniumchloride　十烷基三甲基氯化銨　質(zhì)量規(guī)格：≥50%,BR

Trimethyloctylammoniumchloride　辛基三甲基氯化銨;八烷基三甲基氯化銨　質(zhì)量規(guī)格：≥500IU/mg,BR,牛源提取

L-Lysine　L-賴氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥50U/mg,sigma原裝

L-Lysine　L-賴氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥50U/mg,美侖

L-Tryptophan　L-色氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥580IU/mg,BR

L-Tryptophan　L-色氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：≥595μg/mg,BR

L-Serine　L-絲氨酸　質(zhì)量規(guī)格：≥600I.U./mg,USP,BR