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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0909

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一重度男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代；5-6天一次

傳代情況: P2

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

PD184352(CI-1040)(CI-1040)

PD98059PD-98059質(zhì)量規(guī)格：>98%,MEK抑制劑

PF299804（EGFR抑制劑）Dacomitinib質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

PF-562271PF562271質(zhì)量規(guī)格：>98%，F(xiàn)AK抑制劑

PH-797804PH-797804質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

PI3K抑制劑154447-36-6

PKI-tidePKI-tide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

PLX4720PLX-4720質(zhì)量規(guī)格：>98%，B-RafV600E抑制劑

Pneumadin，大鼠Pneumadin130918-90-0

Pneumadin，人Pneumadin130918-91-1

PR171關(guān)鍵中間體III(alphaS)-alpha-[(4-Morpholinylacetyl)amino]benzenebutanoyl-L-leucyl-L-phenylalanine質(zhì)量規(guī)格：>97%

PR171關(guān)鍵中間體IIPR171II

PR171關(guān)鍵中間體IPR171I

PR171關(guān)鍵中間體IVBoc-HPh-Leu-Phe-Ome質(zhì)量規(guī)格：>97%

pre-ELM-11(>98.0%(T))pre-ELM-11質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0909供應(yīng)商Procymidon　腐霉利(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Pymetrozin　吡蚜酮(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Propanil　敵稗(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Imazalilsolution　抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Isoprothiolanesolution　稻瘟靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Metalaxylsolution　甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=5%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Fenitrothion　殺磷(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

 (2-Chloroethyl)trimethylammoniumchloride　矮壯素(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Brassinolide　蕓苔素內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Acetamiprid　啶蟲脒(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Carbendazim　多菌靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Carbaryl　西維因(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Stachydrinehydrochloride　鹽酸水蘇堿(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Isosilybin　異水飛薊賓(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%)　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Theaflavin3,3′-digallate　3,3’-二沒(méi)食子酸酯茶黃素(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC))　質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR