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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細胞名稱 小鼠骨髓雜交瘤細胞株；10H4

形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCL

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL

HuH-7人細胞 Human

小鼠細胞(NK靶細胞);YAC-1

PAK4  p21激活激酶4抗體規(guī)格： 0.2ml

Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560)  磷酸化p21激活激酶4、5、6抗體規(guī)格： 0.1ml

Phospho-PAK4 (Ser99)  磷酸化p21激活激酶4抗體規(guī)格： 0.1ml

PAI-2  纖溶酶原激活物抑制因子2抗體規(guī)格： 0.2ml

phosphor-PAK1+PAK2+PAK3 (Ser141)  磷酸化p21激活激酶1/2/3抗體規(guī)格： 0.1ml
小鼠骨髓雜交瘤細胞株；10H4說明書eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit  兔內(nèi)皮型一化氮合成酶規(guī)格：300mg重組 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NCAM-L1/CD171(Human Neural cell adhesion molecule ligand 1) ELISA Kit  神經(jīng)細胞粘附分子配體1規(guī)格：200mg重組 ACK1 / TNK2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

ACE II ELISA Kit  緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶規(guī)格：400mg重組 JNK2 / MAPK9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ACE I ELISA Kit  緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶規(guī)格：25mg重組 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA Kit  兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體規(guī)格：200mg重組 SerpinG1 / C1 inhibitor / C1IN 蛋白 (His 標(biāo)簽)

Plant Vitamin D2,VD2 ELISA Kit   植物維生素D2規(guī)格：100mg重組 Osteonectin / SPARC 蛋白 (His 標(biāo)簽)

Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit  角化細胞因子/雙調(diào)蛋白規(guī)格：25mg重組 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CVNPF(Human Cobra venom neuronal protective factor) ELISA Kit  神經(jīng)保護因子規(guī)格：1．5g重組 CD86 / B7-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

鉤藤甙元 CHPLC≥98%ELISA Kit for Adipose Differentiation Related Protein (ADRP)

鉤吻綠HPLC≥98%ELISA Kit for General Transcription Factor IIB (GTF2B)

光甘草寧HPLC≥98%ELISA Kit for Macrophage Expressed Protein 1 (MPG1)

皮脂酸HPLC≥98%ELISA Kit for Anti-PL12 Antibody

桂二萜醇HPLC≥98%ELISA Kit for Anti-PL7 Antibody

果藥烯HPLC≥98%ELISA Kit for Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1 (HNRPA2B1)

過麥角甾醇               HPLC≥98%ELISA Kit for Anti-Neuronal Nuclear Antibody 2 (ANNA2)

海膽靈HPLC≥98%ELISA Kit for Anti-Sa Antibody