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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
雜交瘤細(xì)胞株;K3L25供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZX8255
  • 發(fā)布日期: 2020-12-10
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZX8255
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 A型
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 懸浮生長
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

產(chǎn)品名稱

雜交瘤細(xì)胞株;K3L25供應(yīng)商

生長特性

懸浮生長

貨號

LZX8255

細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株;K3L25

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

 

 

傳代方法:

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

(二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

注意事項(xiàng):

1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

 

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
綿羊血清(無菌過濾)生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:廣譜角蛋白(PCK)或細(xì)胞角蛋白-19(CK-19)免疫熒光染色為陽性。經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%

脫纖維馬血(無菌)復(fù)蘇細(xì)胞步驟:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

雞血清(無菌過濾)生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:結(jié)蛋白(Desmin)或者平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性

昆蟲SF9細(xì)胞專用血清生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:廣譜角蛋白(PCK)或細(xì)胞角蛋白-19(CK-19)免疫熒光染色為陽性。經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%

四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)專用胎牛血清生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:假性因子(vWF)免疫熒光染色為陽性

抗凝綿羊血(無菌)生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:結(jié)蛋白(Desmin)或者平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性

細(xì)胞融合專用胎牛血清特征特性:抗原表達(dá): CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產(chǎn)物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達(dá)顯示其骨家族細(xì)胞特性。 在本庫通過支原體檢測。細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

抗凝新生牛血(無菌)生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性

綿羊紅細(xì)胞6%(無菌)生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:假性因子(vWF)免疫熒光染色為陽性該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

VERO細(xì)胞專用血清生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:細(xì)胞角蛋白-8(CK-8)免疫熒光染色為陽性,經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%

抗凝山羊血(無菌)生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:CD44免疫熒光染色為陽性。細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因

脫纖維新生牛血(無菌)細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。培養(yǎng)條件:準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,15%;L-Glu,1%;NEAA,1%;丙酮酸鈉,1%; 添加1uL/mLβ-Me和0.1uL/mLLIF; 雙抗,1%;培養(yǎng)瓶用0.1%明膠包被,或者使用昆明白MEF作為飼養(yǎng)層細(xì)胞。

抗凝驢血(無菌)生長特性:貼壁生長細(xì)胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

二倍體細(xì)胞專用胎牛血清復(fù)蘇細(xì)胞步驟:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

巴比西鼠血清(無菌過濾)生長特性:貼壁培養(yǎng)特征特性:骨骼肌細(xì)胞是人和動物體內(nèi)*的細(xì)胞之一,它們是由成肌細(xì)胞(Myoblasts)融合而來的多核細(xì)胞,故骨骼肌的形成是一個非常復(fù)雜的過程,并需要多種細(xì)胞信號通路的參與,包括phosphatidylinositol 3-kinase,calcineurin,STAT3和MAPK等。原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)是研究細(xì)胞分化過程的有效的模型。

γ照射處理胎牛血清培養(yǎng)條件:DMEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗1%傳代方法:1:2到1:5的比例

狗血清(無菌過濾)復(fù)蘇細(xì)胞步驟:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

脫纖維驢血(無菌)生長特性:貼壁特征特性:This cell line may be used for both in vitro and in vivo studies of a rat brain tumor. It grows well in cellculture and provides a simple,reproducible glioma model when inoculated into the brains ofsyngeneic rats.The RG2 and F98 (ATCC CRL-2397) gliomas can be used as rat brain tumor models inexperimental neuro-oncology.

細(xì)胞生物學(xué)>細(xì)胞培養(yǎng)基復(fù)蘇細(xì)胞步驟:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

DMEM(H)(含雙抗,不含丙酮酸鈉)復(fù)蘇細(xì)胞步驟:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
雜交瘤細(xì)胞株;K3L25供應(yīng)商CD4 Others Human  CD4 / LEU3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7

NCF2 Others Human  NCF-2 / NCF2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4 軟組織細(xì)胞,TE 115.T細(xì)胞 Eca-109(細(xì)胞)

小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H209

小氣道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

Phospho-HP1(Tyr43)  異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體(果蠅)規(guī)格: 1ml

HPL/PL  胎盤泌乳素抗體規(guī)格: 0.2ml

HPR1/p84  核基質(zhì)p84蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

HPV  類狀瘤病毒抗體規(guī)格: 0.2ml

HPV16-E6  類狀瘤病毒16抗體規(guī)格: 0.1ml

 


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