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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
CHO細胞株;CHOK1-R-ng-D3G6C11說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZX8308
  • 發(fā)布日期: 2020-12-10
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZX8308
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 A型
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 懸浮生長
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格
純度 %
是否進口

特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

產(chǎn)品名稱

CHO細胞株;CHOK1-R-ng-D3G6C11說明書

生長特性

懸浮生長

貨號

LZX8308

細胞名稱 CHO細胞株;CHOK1-R-ng-D3G6C11

形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

 

 

傳代方法:

產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好。

注意事項:

1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

 

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
含鐵牛奶培養(yǎng)基細胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。培養(yǎng)基:1640,90%;FBS,10%;雙抗。

亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS)生長特性:貼壁生長特征特性:HIC是一株小組織衍生細胞系。其具有生長快、易培養(yǎng)、形態(tài)均一等特點。適宜做細胞生物學(xué)研究,也可用于物篩選和其他研究。

硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(FT)(需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基)細胞種屬:人生長特性:貼壁

0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基上皮細胞生長特性:貼壁生長

Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑細胞種屬:人生長特性:懸浮

PALCAM瓊脂凍干配套試劑生長特性:體內(nèi)生長特征特性:可在兔皮下、肌肉、肝臟、肺等部位移植,100%成瘤。皮下或肌肉移植100%肺轉(zhuǎn)移。

李氏增菌液LB2凍干配套試劑實體瘤細胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

李氏增菌液LB1凍干配套試劑細胞種屬:人生長特性:貼壁

EB增菌液凍干配套試劑細胞種屬:大鼠生長特性:貼壁

胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基TSA淋巴母細胞生長特性:懸浮生長

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基)細胞種屬:人生長特性:貼壁

營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(普通肉湯培養(yǎng)基)細胞種屬:人生長特性:貼壁

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基(真菌營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基)生長特性:懸浮細胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

改良馬丁培養(yǎng)基 (真菌培養(yǎng)基)細胞種屬:人生長特性:貼壁

胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(大豆消化酪素瓊脂培養(yǎng)基)TSA細胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。細胞凍存步驟:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

酪蛋白消化物-大豆卵磷脂-吐溫20培養(yǎng)基(SCDLP 20 肉湯)細胞種屬:豬生長特性:貼壁

孟加拉紅培養(yǎng)基(虎紅瓊脂)細胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。細胞凍存步驟:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)細胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。細胞凍存步驟:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基生長特性:貼壁細胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 (硝酸鹽胨水培養(yǎng)基)生長特性:貼壁細胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
CHO細胞株;CHOK1-R-ng-D3G6C11說明書2,5-雙(4-氨苯基)-1,3,4-惡二唑(>98.0%(HPLC))2,5-Bis(4-aminophenyl)-1,3,4-oxadiazole質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)

2,6-二氯靛酚鈉(DCIP)2,6-Dichloroindophenol,salt

2,6-二氯醌-4-氯亞胺(>98%,BR)101-38-2

2,6-二氯嘌呤2,6-Dichloropurine質(zhì)量規(guī)格:>97%,原裝進口

2,6-二溴蒽(>98.0%(HPLC))2,6-Dibromoanthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

2,6-二溴蒽醌(>95.0%(HPLC))2,6-Dibromoanthraquinone質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)

2,6-二溴酚靛酚鈉2,6-Dibromophenolindophenolsalt

2,6-二溴萘(>98.0%(GC))2,6-Dibromonaphthalene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

2,6-萘二羧酸(>98.0%(GC)(T))2,6-Naphthalenedicarboxylic1141-38-4

2,7-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)-2-基)-9,9-十二烷芴(>98.0%(HPLC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-dihexylfluorene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

2,7-二氨基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Diaminofluorene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))2',7'-Dichlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)

2,7-二羥基萘(>98%,BR)2,7-Dihydroxynaphthalene質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

2,7-二叔丁基芘(>98.0%(GC))2,7-Di-tert-butylpyrene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

 


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