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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；1C9H6F2C1

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 可產(chǎn)生單抗體

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C30

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類(lèi)試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

人腸三葉因子(ITF)Elisa Kit(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Stachydrine hydrochloride　100mg

人腸病毒(Enterovirus)Elisa Kit(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Betaine hydrochloride　1mg

人層連蛋白/板層素(LN)Elisa Kit(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Emetine Hydrochloride　1mg

人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)Elisa Kit(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Berbamine Hydrochloride　1mg

人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)Elisa Kit(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Berberine hydrochloride　1mg

人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)Elisa Kit(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Jatrorrhizine hydrochloride　1mg

人不對(duì)稱二甲基精(ADMA)Elisa Kit(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Leonurine hydrochloride　1mg

人補(bǔ)體因子D(CFD)Elisa Kit(學(xué)發(fā)光免疫分析法)Yohimbine Hydrochloride　10mg

Donkey Antirabbit IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgG    特價(jià)促銷(xiāo) 0.1mlMouse βHCG ELISA Kit

Donkey Antirabbit IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的驢抗兔IgG    特價(jià)促銷(xiāo) 0.1mlMouse HCG ELISA Kit

Donkey Antirabbit IgG/PE  PE標(biāo)記的驢抗兔IgG    特價(jià)促銷(xiāo) 0.1mlMouse pregnancy associated plasma proteinA ELISA Kit

Donkey Antirabbit IgG/PECy3  PECy3標(biāo)記的驢抗兔IgG    特價(jià)促銷(xiāo) 0.1mlMouse Heat Shock Protein 90 ELISA Kit

Donkey Antirabbit IgG/PECY5  PECY5標(biāo)記的驢抗兔IgG    特價(jià)促銷(xiāo) 0.1mlMouse Heat Shock Protein 70 ELISA Kit

Donkey Antirabbit IgG/APC  APC標(biāo)記的驢抗兔IgG    特價(jià)促銷(xiāo) 0.1mlMouse heat shock protein 60 ELISA Kit

Donkey Antirabbit IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗兔IgG    特價(jià)促銷(xiāo) 0.1mlMouse Heat Shock Protein 40 ELISA Kit

Donkey Antirabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗兔IgG    特價(jià)促銷(xiāo) 0.1mlMouse Heat Shock Protein 20 ELISA Kit
小鼠雜交瘤細(xì)胞；1C9H6F2C1說(shuō)明書(shū)中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： ELA2 ELISA Kit

Mouse soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)酶聯(lián)免疫試劑盒

MouseFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanhumanlysosomal-associatedmembraneprotein2,HLAMP-2ELISAKit溶酶體相關(guān)膜蛋白2規(guī)格：48T/96T

維生素B1比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitDes結(jié)蛋白規(guī)格：48T/96T

犬肌紅蛋白(MYO/MB) 酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

山羊雌激素(E)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Esogen,E ELISA Kit

末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： TdT ELISA Kit

RatAcetylcholinesterase,AChE酶聯(lián)免疫試劑盒乙酰膽堿酯酶(AChE)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanCandidaAlbicans,C.albicans酶聯(lián)免疫試劑盒白色念珠菌(C.albicans)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISAKit脫氫表雄同S7(DHEA-S7)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T