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商品屬性：

產(chǎn)品名稱：大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
規(guī)格： 5*10 5
隨著人們生活水平的提高，飲食習(xí)慣的改變，率也在不斷的增加，如、和大等明顯增加的趨勢(shì)。肝臟作為人體重要的器官，在整個(gè)物質(zhì)代謝過(guò)程中具有廣泛而多樣的功能。肝臟也是體內(nèi)藥物代謝的重要器官，體內(nèi)復(fù)雜的環(huán)境對(duì)藥物代謝等的影響是不言而喻的。但是在體研究藥物或其它化學(xué)物質(zhì)在肝的分子機(jī)制有一定的困難，因此我們建立體外的原代肝細(xì)胞培養(yǎng)模型用于肝細(xì)胞分子生物學(xué)特征的研究，作為對(duì)在體肝臟研究模型的有益補(bǔ)充。采用改良的灌流方法將肝臟中的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離、純化、體外培養(yǎng)，全面分析原代肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能狀態(tài)，為肝細(xì)胞分子生物學(xué)特征的研究以及新藥對(duì)肝臟的作用機(jī)制的研究提供更有價(jià)值的線索，以更好的解釋藥物作用的機(jī)制。
細(xì)胞特性
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常肝組織。本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，增殖能力很弱，建議客戶收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)，不要進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。
2)細(xì)胞鑒定：葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase)化學(xué)染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
5）細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議使用完全培養(yǎng)基。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)。
5. 該細(xì)胞只能用于科研。
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。 天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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