免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
別 名 KLHL; BKLHD6; BTB and kelch domain containing protein 6; KBTBD1; Kelch like protein 31; Kelch like protein KLHL; Kelch repeat and BTB domain containing protein 1; KLH31_HUMAN.
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
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產(chǎn)品名稱
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Kelch樣蛋白31抗體0.2ml/200μg
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英文名稱
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Anti-KLHL31
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貨號(hào)
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LZK63987
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英文名稱 Anti-KLHL31
中文名稱 Kelch樣蛋白31抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Zebrafish
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 70kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human KLHL31
亞 型 IgG
抗體的制備過(guò)程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。聯(lián)祖保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù)：
（一）原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
（二）準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。
（三）操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
蛋白磷酶抑制劑混合液Ⅰ 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgQuercetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-7-O-β-D-gentiobiosid
蛋白磷酶抑制劑混合液Ⅱ 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgMyricetin
蛋白酶抑制劑混合液 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgDihydromyricetin
二氯異溶液，10 mg/mL 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgMyricitrin
非變性法蛋白沉淀試劑盒 規(guī)格：HPLC≥98%;20mg1,7-Dihydroxy-3,4-dimethoxylxanthone-7-O-glucoside
鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液，10 mg/mL 規(guī)格：HPLC≥98%;20mg3,3’-Di-O-methylellagic acid
鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液，10 mg/mL 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgEllagic acid
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格：HPLC≥98%;20mg5,7-dihydroxychromone
核清除劑 規(guī)格：HPLC≥98%;10mgLycorine
抗凝血酶Ⅲ，10 mg/mL 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgLycorine hydrochloride
亮抑蛋白酶胎溶液，10 mg/mL 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgLycobetaine
膦酰二肽溶液，10 mg/mL 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgLycopene
魯米諾血跡鑒定試劑盒 規(guī)格：HPLC≥95%;20mgSennoside A
咪唑 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgSennoside B
咪唑溶液，2 M 規(guī)格：HPLC≥98%;20mgSennoside C
血小板衍生生長(zhǎng)子C(PDGFC)檢測(cè)試劑盒(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Homo sapiens (Human)
血小板衍生生長(zhǎng)子C(PDGFC)檢測(cè)試劑盒(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Mus musculus (Mouse)
血小板衍生生長(zhǎng)子C(PDGFC)檢測(cè)試劑盒(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Rattus norvegicus (Rat)
血小板衍生生長(zhǎng)子B(PDGFB)檢測(cè)試劑盒(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Homo sapiens (Human)
Kelch樣蛋白31抗體0.2ml/200μg血小板衍生生長(zhǎng)子B(PDGFB)檢測(cè)試劑盒(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Mus musculus (Mouse)
血小板衍生生長(zhǎng)子B(PDGFB)檢測(cè)試劑盒(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Sus scrofa; Porcine (Pig)
血小板衍生生長(zhǎng)子B(PDGFB)檢測(cè)試劑盒(學(xué)發(fā)光免疫分析法) Rattus norvegicus (Rat)
人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人血清素/血清(ST)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T
人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人素A2(TXA2)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T 人未基寡聚脫氧核苷(CpGODN)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T
人維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T
人維生素E(VE)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T
人維生素D受體(VDR)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T
