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免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
別    名  bA145H9.2; C6orf195; CF195_HUMAN; Chromosome 6 open reading frame 195; FLJ31934; RP11-145H9.2; Uncharacterized protein C6orf195.

純化方法  affinity purified by Protein A

儲(chǔ) 存 液  Preservative: 15mM Soium zde, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 

產(chǎn)品名稱	6號(hào)染色體開放閱讀框195抗體0.2ml/200μg
英文名稱	Anti-C6orf195
貨號(hào)	LZK64088

英文名稱  Anti-C6orf195

中文名稱  6號(hào)染色體開放閱讀框195抗體

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human,

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 14kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human C6orf195

亞    型  IgG

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。聯(lián)祖保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

 

 

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

YNB 含量：≥ 98% 規(guī)格：20 mg/支

鐿 含量：≥ 98% 規(guī)格：20 mg/支

Ytterbium(III) nitrate 含量：>99% 規(guī)格：20mg/支

玉米素 含量：≥ 98% 規(guī)格：20 mg/支

Zeatin 含量：≥ 98% 規(guī)格：20 mg/支

博來霉素 含量：≥ 98% 規(guī)格：20 mg/支

Zeocin 含量：≥ 98% 規(guī)格：20 mg/支

3丙十四二甜菜 含量：≥ 98% 規(guī)格：20 mg/支

苦龍膽苷 21018848 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;10mg

雌 56531 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;100mg

蜂斗菜內(nèi)A 19906720 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

對(duì)氧 123115 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

扁塑藤素 1258840 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

異黃芪皂苷II 86764116 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;10mg

紫蘇 539526 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

美決明子素  訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

羥酪 10597601 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

番茄紅素 502658 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

鴉膽子素D  訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

腺苷 58617 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥99%;20mg

對(duì)傘（對(duì)聚傘花素） 99876 訂購|咨詢  規(guī)格： GC≥99%;0.5mL

辛辣內(nèi)A 130430976 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;5mg

伽升沃 D 107390089 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
游離三狀腺原氨(FreeT3)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Human FreeT3 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T

游離特異性抗原(FREE PSA)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 FREE PSA 規(guī)格: 96T/48T

小鼠組織子途徑抑制物（TFPI)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse Tissue factor pathway inhibitor ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T

小鼠組織子(TF)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse Tissue factor ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T

小鼠組織型纖溶酶原激活劑(tPA)ELISA分析檢測(cè)試劑盒  Mouse tPA ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T

小鼠組織相容性抗原（HLA2)ELISA分析檢測(cè)試劑盒 Mouse HLA2 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T

小鼠水通道蛋白4(AQP4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

小鼠水通道蛋白5(AQP5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

小鼠絲氨/蘇氨蛋酶(STK)ELISA試劑盒 規(guī)格：96T/48T    

小鼠髓過物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPOANCA IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

6號(hào)染色體開放閱讀框195抗體0.2ml/200μg小鼠髓脂性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

小鼠酶(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T    

小鼠酶2(CA2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T