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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：

一、準備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
別    名  C22orf26; Chromosome 22 open reading frame 26; CV026_HUMAN; FLJ10945; Putative uncharacterized protein C22orf26.

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  Preservative: 15mM Soium zde, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 

產(chǎn)品名稱	22號染色體開放閱讀框26抗體0.2ml/200μg
英文名稱	Anti-C22orf26
貨號	LZK64305

英文名稱  Anti-C22orf26

中文名稱  22號染色體開放閱讀框26抗體

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域   細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

蛋白分子量  predicted molecular weight: 15kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human C22orf26

亞    型  IgG

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。聯(lián)祖保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

 

 

抗體分子標記技術(shù)：

（一）原理

當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

齊留通相關(guān)物質(zhì)B標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 

齊留通相關(guān)物質(zhì)C標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 

氧鋅標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 1314132

鹽拉西標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 33754493

來瞵相關(guān)物質(zhì)A標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 22884102

標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 82626480

酒石標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 99294936

相關(guān)物質(zhì)A標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 

尼沙標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 68291974

尼沙相關(guān)物質(zhì)A標準品 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 73101641

HRP標記羊抗小鼠IgG 訂購|咨詢 進口/國產(chǎn) 3000付/箱

HRP標記羊抗兔IgG 訂購|咨詢 進口/國產(chǎn) 250克

HRP標記羊抗馬IgG 訂購|咨詢 進口/國產(chǎn) 250克

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辣根酶標記山羊抗兔IgG 訂購|咨詢 進口/國產(chǎn) 250克

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植物DNAoutAmmonium Sulfate Solution,1M 1.5mL

柱式植物DNAoutAMP Buffer，0.5M，pH10.0 1.5mL

磁珠植物DNAoutAMP Buffer，0.5M，pH10.5 1.5mL

大提柱式植物DNAoutAMP Buffer，0.5M，pH9.0 1.5mL

百萬基級植物DNAout AMP Buffer，0.5M，pH9.5 1.5mL

Southern級植物DNAout AMP Na21.5mL

一管式植物DNAoutAMPD Buffer，0.2M，pH7.5 1.5mL

一管式植物DNAoutAMPD Buffer，0.2M，pH8.0 1.5mL

中草藥DNAoutAMPD Buffer，0.2M，pH8.5 1.5mL

中草藥DNAoutAmphotericin B Solubilized1.5mL

22號染色體開放閱讀框26抗體0.2ml/200μg柱式植物油DNAoutAmphotericin B Solution1.5mL

木材DNAoutAmpicillin Powder1.5mL

柱式醬油DNAoutAmpicillin Solution1.5mL

溶壁酶干粉Ampicillin, Sodium Salt1.5mL

蝸牛酶干粉AMPPD10 g