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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
別    名  bA18I14.5; C10orf66; Chromosome 10 open reading frame 66; CUE domain containing 2; CUE domain-containing protein 2; CUED2; CUED2_HUMAN; Cuedc2; MGC2491; OTTHUMP00000020368.

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Soium zde

產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500 

英文名稱  Anti-CUEDC2/CUE domain containing 2

中文名稱  CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 表觀遺傳學(xué) 泛素

蛋白分子量  predicted molecular weight: 32kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human CUE domain containing 2

亞    型  IgG

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量 時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用采血，家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。聯(lián)祖保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

甲甲 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100734200401

醋 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100735200401

葡萄糖 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100736200401

鹽索他洛爾 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100737200501

拉西地平 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100741200501

尼麥角林 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100742200501

鹽賽洛啉 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100744200401

二氫 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100745200401

長春 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100747200501

鹽咪達普利 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 100748200401

鮭降鈣素 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 140734200501

5’胞苷 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 140735200501

4'羥基乙 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 140736200501

5'羥基吲哚乙 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 140737200501

馬尿 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 140738200501

谷酰 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 140739200501

抗眼鏡蛇毒血清 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 140740200501

游離甲狀 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 5530106

游離三甲狀腺原氨 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 5520105

洋地黃 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格: 5018004
galgravin豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒0.999

eleutheroside B1豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒0.99

Benzoic acid豬去甲(NE)ELISA試劑盒0.99

Goitrine豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GLUT2)ELISA試劑盒 0.999

CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體0.2ml/200μgIndirubin豬皮質(zhì)/腎上腺(CORT)ELISA試劑盒0.999

Indigo豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒0.997

Betulinic acid 豬內(nèi)皮型一氧合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒0.998

Betulin豬內(nèi)皮型一氧合成酶(eNOS)ELISA試劑盒0.997