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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
細胞骨架相關(guān)蛋白4抗體0.2ml/200μg
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZK64503
  • 發(fā)布日期: 2021-02-24
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZK64503
保存條件 Store at -20 °C
用途
應用范圍 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
抗原來源 Rabbit
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
抗體名 細胞骨架相關(guān)蛋白4抗體
是否單克隆
克隆性
靶點 詳見說明書
適應物種 詳見說明書
形態(tài) 詳見說明書
宿主 詳見說明書
標記物 詳見說明書
包裝規(guī)格 0.2ml/200μg
純度 %
亞型 IgG
標識物 詳見說明書
濃度 1mg/1ml%
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from hu CD8B
是否進口

抗體的制備過程:

1. 免疫原:普通的大分子蛋白,聯(lián)祖通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量 時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采血,家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

     p63; 63 kDa membrane protein; CKAP 4; CLIMP 63; CLIMP63; Cytoskeleton associated protein 4; ERGIC 63; ERGIC63; MGC99554; Transmembrane protein 63kD endoplasmic reticulum Golgi intermediate compartment; Type II transmembrane protein p63; CKAP4_HUMAN.

純化方法  affinity purified by Protein A

 Preservative: 15mM Soium zde, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產(chǎn)品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  Flow-Cyt=1:100-500  IF=1:100-500 

產(chǎn)品名稱

細胞骨架相關(guān)蛋白4抗體0.2ml/200μg

英文名稱

 Anti-CKAP4

貨號

LZK64503

英文名稱  Anti-CKAP4

中文名稱  細胞骨架相關(guān)蛋白4抗體

     1mg/1ml

規(guī)  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域   細胞生物 免疫學 細胞生物標志物

蛋白分子量  predicted molecular weight: 66kDa

     Lyophilized or Liquid

 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CKAP4

     IgG

免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:

一、準備好試劑與儀器:

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

 

抗體分子標記技術(shù):

(一)原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

(二)準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;

2.儀器

凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。

(三)操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

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